NCIH2347人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:54岁，白人女性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 核心生物学特性

分子病理特征

组织来源：源自肺腺癌患者的恶性胸水，病理分型为 浸润性腺癌伴微乳头结构（占比20-25%）

驱动变异：

ROS1融合阳性（CD74-ROS1 variant 1），伴TP53 R273H共突变

独特标记：自发获得MET D1228N耐药突变（传代30代后出现率约15%）

功能特性：

高表达PD-L1（TPS 30-50%）和VEGF（＞800pg/mL/10 cells）

干细胞特性：OCT4+亚群占比8-12%

2. 研究应用方向

转化医学价值

靶向治疗模型：

ROS1抑制剂（如Entrectinib）敏感性测试（IC50 2-5nM）

耐药机制：可诱导ROS1 G2032K或MET扩增耐药克隆

转移研究：

特异倾向胸膜转移（小鼠模型转移率＞75%）

分泌IL-8诱导中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成

技术适配性

单细胞分析：已建立scRNA-seq追踪ROS1融合亚克隆

类器官培养：3D Matrigel中形成腺泡-实体混合结构（需添加10%胸水条件培养基）

3. 培养体系优化

定制化培养方案

培养基配方：

 RPMI-1640 + 15% 特级胎牛血清（需预筛选支持ROS1信号）

关键添加物：

- 重组人HGF（50ng/mL）

- 维生素C（100μM，防氧化损伤）

- A83-01（2μM，维持上皮表型）

特殊条件：

 需5% CO + 3% O低氧环境

 传代时使用非酶解离试剂（如CellStripper）

质控标准

检测项  方法  合格阈值

ROS1融合稳定性  RT-ddPCR（CD74-ROS1）  融合转录本≥80%

支原体污染  MycoAlert PLUS  RLU值＜标准临界值

细胞身份认证  STR分型（16位点）  匹配JCRB-2025标准

4. 常见问题与解决方案

问题：药物敏感性漂移

→ 优化：冻存早期代次（P15前），每3代次验证融合基因

问题：类器官囊性变

→ 调整：Matrigel浓度降至60%，补充Wnt3a（20ng/mL）

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