NCIH2195 [H2195]人小细胞肺癌

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性，67岁

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:淋巴母细胞

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F12 + 0.005 mg/ml Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30nM Sodium selenite + 10 nM Hydrocortisone + 10 nM beta-estradiol + extra 2mM L-glutamine + 5% fetal bovine serum 

基础信息

组织来源：广泛期SCLC患者脑转移灶

病理特征：

典型小细胞形态（高核质比，染色质"椒盐"样）

神经内分泌标志物：Synaptophysin+++/CD56++/Chromogranin A±

认证信息：

STR分型匹配JCRB 0076标准（需每6个月验证）

支原体检测：每月PCR（引物：Myco-5/Myco-3）

分子特征谱

1. 核心驱动变异

基因  变异类型  临床意义

TP53  R248W（DNA结合域）  基因组不稳定性

RB1  Exon10剪切突变  细胞周期失控

MYCL1  扩增（FISH≥6 copies）  高转移潜能

DLL3  膜表达（流式>95%）  靶向治疗靶点

2. 表观遗传特征

flowchart LR

A[EZH2过表达] --> B[全局H3K27me3升高]

C[ASCL1增强子] --> D[神经内分泌表型]

E[SLFN11沉默] --> F[拓扑替康耐药]

培养标准化方案

培养体系优化

参数  标准方案  神经球培养方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  Neurobasal-A + B27

关键添加剂  0.1mM β-巯基乙醇  20ng/mL EGF/FGF2

传代方法  机械吹散+40μm滤网  悬浮传代（不消化）

冻存条件  程序冻存（-1℃/min）  CryoStor CS10

关键注意事项

细胞团处理：

DNA酶I（100U/mL, 5min）解聚大团块

避免过度吹打（维持干细胞特性）

支原体防控：

BM-Cyclin交替使用（5μg/mL, 每3代）

定期MycoAlert检测（阈值≤1.0 RLU）

形态监控：

异常贴壁提示分化（需CD56磁珠分选）

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