NCIH2110人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 核心生物学特性

分子病理特征

组织来源：源自肺腺癌患者脑转移灶，病理分型为 实体型腺癌伴神经内分泌分化（含混合表型）

驱动变异：

EGFR exon19缺失（E746-A750） + T790M继发突变（原发耐药模型）

特殊共突变：MET扩增（拷贝数≥6）和TP53 R175H

转移特性：

血脑屏障穿透性强（体外BBB模型穿透率＞25%）

高表达CD133（干细胞标记）和CXCR4（转移趋化因子受体）

功能标志物

神经内分泌标记：Synaptophysin（+）、CD56（弱+）

耐药相关蛋白：ABCG2高表达（流式检测MFI≥5×103）

2. 核心科研价值

转化医学应用

靶向治疗研究：

三代EGFR-TKI（奥希替尼）耐药机制（可诱导MET/YAP双激活）

MET抑制剂（Capmatinib）联合EGFR-TKI的协同效应评估

脑转移研究：

血脑屏障穿透性药物筛选（如AZD3759）

脑微环境共培养模型（与星形胶质细胞相互作用）

技术适配性

单细胞多组学：已建立scRNA-seq+空间转录组联合分析流程

类器官模型：Matrigel中形成实性球体（需添加10%脑脊液替代物）

3. 培养体系优化

定制化培养方案

培养基配方：

 Neurobasal-A + 2% B27 + 1% N2 + 10% FBS（模拟脑微环境）

关键添加物：

- EGF（20ng/mL） + bFGF（10ng/mL）

- Heparin（2μg/mL，防聚集）

- 奥希替尼（1μM，维持耐药表型）

培养条件：

 需5% CO + 3% O低氧环境

 使用聚-D-赖氨酸包被培养器皿

质控标准

检测项  方法  合格阈值

EGFR/T790M稳定性  ddPCR（双突变检测）  突变频率均≥80%

支原体污染  MycoAlert PLUS  RLU值＜标准临界值

细胞侵袭性  Transwell（Matrigel）  穿透细胞数＞200/孔

4. 常见问题解决方案

问题：细胞自发分化

→ 优化：每代次磁珠分选CD133+亚群（保持干细胞特性）

问题：类器官形成松散

→ 调整：Matrigel浓度提升至80%，补充10%条件培养基

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