NCIH211 [H211]人小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:50岁，白人女性

组织来源:肺

生长特性:悬浮生长

细胞形态:圆形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

基础信息

组织来源：SCLC患者骨髓转移灶（广泛期）

病理特征：

经典小细胞形态（高核质比，染色质弥散）

神经内分泌标志物：Synaptophysin++/CD56++/Chromogranin A+

认证状态：

STR分型符合ATCC CRL-5825标准（需每6个月验证）

支原体检测：每月MycoAlert（阈值≤1.0 RLU）

 分子特征谱

1. 核心驱动变异

基因  变异类型  临床意义

TP53  R248Q（DNA结合域）  导致基因组不稳定性

RB1  Exon4剪切突变  细胞周期调控失活

MYC  扩增（≥8 copies）  与极强侵袭性相关

PARP1  过表达（IHC 3+）  对PARPi敏感（Olaparib IC50=82nM）

2. 表观遗传特征

flowchart LR

A[EZH2过表达] --> B[全局H3K27me3升高]

C[ASCL1超增强子] --> D[神经内分泌分化]

E[SLFN11甲基化] --> F[拓扑替康耐药]

培养标准化方案

培养体系优化

参数  标准方案  神经球培养方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  Neurobasal-A + B27补充剂

关键添加剂  0.1mM β-巯基乙醇  20ng/mL EGF + 20ng/mL FGF2

传代方法  机械吹散（保留细胞团）  悬浮传代（不消化）

冻存条件  程序降温（-1℃/min）  玻璃化冷冻（CryoStor CS10）

关键注意事项

细胞团处理：

使用100μm细胞筛过滤去除超大团块

短暂低浓度胰酶（0.025%）处理可提高单细胞率

支原体防控：

预防性使用BM-Cyclin（5μg/mL交替使用）

定期PCR检测（引物：5'-GGCGAATGGGTGAGTAAC-3'）

形态监控：

异常贴壁提示分化（需重新筛选悬浮细胞）

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