NCIH2081人小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:59岁，白人女性

组织来源:肺

生长特性:悬浮生长

细胞形态:圆形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F120.005 mg/ml Insulin0.01 mg/mL Transferrin30nM Sodium selenite (final conc.)10 nM Hydrocortisone (final conc.)10 nM beta-estradiol (final conc.)extra 2mM L-glutamin

1. 核心生物学特性

病理与分子特征

组织来源：源自SCLC患者的淋巴结转移灶，属 经典神经内分泌亚型（ASCL1+/NEUROD1-）

分子标签：

特征性突变：TP53 R273H + RB1 exon16缺失（双等位基因失活）

表观遗传异常：EZH2过表达（H3K27me3修饰水平升高）

特殊标记：高表达CD47（"别吃我"信号）和DLL3（流式检测阳性率＞80%）

功能特性

代谢表型：

糖酵解依赖性强（乳酸分泌量＞15mM/24h）

对谷氨酰胺酶抑制剂（Telaglenastat）敏感（IC50＜100nM）

2. 核心研究应用

转化医学方向

免疫治疗研究：

抗CD47/PD-L1双抗协同作用评估

巨噬细胞-肿瘤细胞共培养极化实验（推荐THP-1细胞系）

靶向治疗模型：

DLL3靶向ADC药物（如SCLC-2025）的敏感性测试

EZH2抑制剂（Tazemetostat）耐药机制研究

前沿技术适配

单细胞多组学：

已建立scRNA-seq+ATAC-seq联合分析流程（可追踪表观遗传演化）

类器官培养：

3D悬浮培养形成致密神经内分泌球体（直径50-80μm）

需添加10μM Y-27632维持干细胞特性

3. 培养体系优化方案

定制化培养条件

基础培养基：

 RPMI-1640 + 15% 热灭活FBS（需预筛选支持神经内分泌表型）

关键添加物：

- N2补充剂（1:100）

- 重组人EGF（20ng/mL）

- 2-巯基乙醇（0.1mM）

特殊处理：

 每72小时补充新鲜L-谷氨酰胺（2mM）

 建议使用超低吸附6孔板（聚集体数量控制在30-50/孔）

质控关键点

检测项目  方法  合格标准

神经内分泌特性  免疫荧光三标（Syn/CD56/CgA）  阳性率≥85%

DLL3表达稳定性  流式检测（PE标记抗体）  MFI≥2×103

支原体污染  MycoAlert PLUS  RLU值＜标准临界值

4. 常见问题解决方案

问题：细胞聚集成团

→ 优化方案：添加DNase I（5μg/mL）+ 轻振荡（50rpm，10min）

问题：类器官形成率低

→ 关键调整：Matrigel浓度提升至80%，补充FGF2（25ng/mL）

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