NCIH2052人间皮瘤细胞

NCIH2052人间皮瘤细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:65岁，白人男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

基础信息：

组织来源：恶性胸膜间皮瘤（上皮型）患者胸水

病理分类：上皮样型（占间皮瘤的60%）

认证信息：STR分型符合ATCC标准（匹配度≥90%）

独特特征：BAP1基因缺失（典型间皮瘤标志）

分子特征图谱：

1. 关键基因变异

基因  变异类型  临床意义

BAP1  纯合缺失  组蛋白修饰异常，对PARPi敏感

NF2  截短突变  mTOR通路激活

TP53  R248W  基因组不稳定性

PD-L1  CPS=15 (22C3抗体)  免疫治疗潜在响应

2. 蛋白标志物

graph TD

A[间皮标志物] --> B[Calretinin+++]

A --> C[WT-1+]

A --> D[D2-40+]

E[治疗靶点] --> F[mesothelin(MSLN)高表达]

E --> G[VEGFR2阳性]

培养标准化方案：

培养体系优化

参数  标准条件  高级方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  DMEM/F12 + 5% FBS + 1% ITS

关键添加剂  1% L-谷氨酰胺  0.1mM β-巯基乙醇

消化方法  胰酶-EDTA (0.05%, 8min)  胶原酶III (1mg/mL, 20min)

冻存密度  1.5×10 cells/vial  程序冻存(-1℃/min)

关键注意事项：

形态监控：典型铺路石样排列（异常梭形提示去分化）

支原体防控：每月PCR检测（引物：5'-ACTCCTACGGGAGGCAGC-3'）

传代阈值：70-80%汇合度（过高易自发脱落）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。