NCIH2030人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞核心特性

分子病理特征

组织来源：源自肺腺癌患者的原发肿瘤组织，病理证实为 实体型腺癌伴微乳头成分（占比15-20%）

驱动变异：

KRAS G12C突变（占比＞95%），伴KEAP1/NRF2通路激活

独特基因型：STK11/LKB1缺失（导致mTOR通路异常活化）

免疫特征：

PD-L1表达阴性（TPS＜1%）

高分泌IL-8（＞800pg/mL/10 cells）诱导中性粒细胞募集

2. 核心科研价值

转化医学应用

靶向治疗模型：

KRAS G12C抑制剂（如Sotorasib）敏感性测试（IC50 50-100nM）

耐药机制：可诱导KRAS Y96D或A59S二次突变模型

代谢研究：

谷氨酰胺依赖性强（谷氨酰胺酶抑制剂CB-839敏感）

线粒体呼吸链复合物I缺陷（适合研究氧化应激）

技术适配性

单细胞分析：已建立scRNA-seq追踪KRAS克隆演化

类器官培养：在Matrigel中形成实性球体（需添加10μM Y-27632）

3. 培养体系优化

定制化培养方案

培养基配方：

 RPMI-1640 + 10% 透析型FBS（降低生长因子干扰）

 关键添加物：

- L-谷氨酰胺（4mM）

- 丙酮酸钠（1mM）

- 二甲双胍（1mM，抑制mTOR过度活化）

特殊条件：

 需定期检测培养基pH（维持7.2-7.4）

 传代时使用非酶细胞解离试剂（如Accutase）

质控标准

检测项  方法  合格阈值

KRAS突变稳定性  ddPCR（G12C）  突变频率≥90%

支原体污染  PCR-电泳双验证  条带阴性

细胞活力  台盼蓝+Calcein-AM双染  存活率＞95%

4. 常见问题解决方案

问题：药物敏感性波动大

→ 优化：统一使用无酚红培养基，预处理24h稳定代谢状态

问题：类器官坏死

→ 调整：降低接种密度至500细胞/μL Matrigel

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