NCIH2023人非小细胞肺癌细胞

NCIH2023人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:26岁，白人男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F120.005 mg/mL Insulin0.01 mg/mL Transferrin30nM Sodium selenite (final conc.)10 nM Hydrocortisone (final conc.)10 nM beta-estradiol (final conc.)extra 2mM L-glutamin⳰

基础信息：

组织来源：肺腺癌（IV期）患者胸膜转移灶

认证状态：STR分型已验证（参照ATCC标准，位点匹配度≥85%）

独特标识：携带ERBB2（HER2）YVMA插入突变（exon20），罕见驱动变异

分子特征图谱：

1. 关键基因变异

基因  变异类型  临床意义

ERBB2  exon20 YVMA插入  对阿法替尼耐药，波齐替尼敏感

TP53  R175H（热点突变）  促基因组不稳定性

CDKN2A  纯合缺失  细胞周期失控

PD-L1  CPS=35（22C3抗体）  免疫治疗潜在响应

2. 蛋白表达特征

graph TD

A[腺癌标志物] --> B[TTF-1+++]

A --> C[Napsin A+]

D[治疗靶点] --> E[HER2(3+ IHC)]

D --> F[PD-L1 22C3+]

G[耐药标记] --> H[MET低扩增]

培养标准化方案：

培养体系优化

参数  标准条件  高级方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  Advanced DMEM/F12 + 5% FBS

关键添加剂  1% NEAA + 1mM丙酮酸钠  0.5% EGF (20ng/mL)

消化方法  胰酶-EDTA (0.25%, 5min)  胶原酶IV (2mg/mL, 15min)

冻存密度  2×10 cells/vial  程序冻存(-1℃/min)

关键注意事项：

形态监控：出现梭形细胞提示EMT转化（建议定期拍摄相位对比图）

支原体防控：每月MycoPlasma PCR检测（引物：5'-GGGAGCAAACAGGATTAGAT-3'）

传代阈值：严格在80%汇合度时传代（防止密度依赖性分化）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。