NCIH2009人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:68岁，白人女性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F12, 0.005 mg/mL Insulin0.01 mg/mL Transferrin30nM Sodium selenite (final conc.)10 nM Hydrocortisone (final conc.)10 nM beta-estradiol (final conc.)extra 2mM L-glutam⳰ꐠ⳰

1. 细胞核心特性

病理与分子特征

组织来源：源自肺腺癌患者的恶性胸腔积液，病理分型为 浸润性腺癌伴微乳头成分（约占细胞群体30%）

驱动变异：

ALK融合阳性（EML4-ALK variant 3a/b），伴TP53 R248Q共突变

独特标记：H2009细胞存在ROS1 G2032R继发耐药突变（自发率约5%）

表型标志物：

上皮-间质混合表型（E-cadherin+/Vimentin+）

干细胞特性：CD44+ALDH1A1+亚群占比8-12%

2. 核心研究价值

转化医学应用

靶向治疗研究：

ALK抑制剂（如洛拉替尼）敏感性模型（IC50 2-5nM）

耐药机制：可诱导ALK G1202R或ROS1扩增耐药克隆

转移机制：

特异倾向胸膜转移（小鼠模型转移率＞80%）

分泌IL-6诱导M2型巨噬细胞极化（ELISA检测＞500pg/mL/10 cells）

技术适配性

单细胞分析：已建立scRNA-seq追踪ALK融合亚克隆演化

类器官培养：气液界面（ALI）培养可形成腺泡样结构

3. 培养体系优化

定制化方案

培养基配方：

 DMEM/F12 (4:1) + 10% 特级胎牛血清（需预筛选支持ALK信号）

 关键添加物：

- 胰岛素（10μg/mL）

- 重组人HGF（50ng/mL，维持侵袭性）

- A83-01（2μM，抑制自发分化）

培养条件：

 需5% O低氧环境（模拟胸膜腔微环境）

 传代时保留条件培养基（比例1:1）

质控要点

检测项  方法  标准

ALK融合稳定性  RT-ddPCR（V3a/b）  融合转录本≥80%

支原体污染  MycoSEQ NGS检测  读数＜50 RPM

细胞身份  STR+SNP双验证  匹配JCRB-2025标准

4. 常见问题解决方案

问题：低氧培养增殖停滞

→ 优化：添加缺氧诱导因子稳定剂（如FG-4592 10μM）

问题：类器官囊性变

→ 调整：Matrigel浓度提升至70%，Wnt3a降至20ng/mL

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