NCIH1435 人肺腺癌细胞

NCIH1435  人肺腺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

细胞特性：

来源与分类

组织类型：人肺腺癌（非小细胞肺癌NSCLC亚型）

分子特征：

驱动基因：需验证EGFR/KRAS/ALK突变状态（建议NGS检测）

PD-L1表达：可能阳性（克隆号22C3检测）

研究价值：

靶向治疗模型（如EGFR-TKI耐药机制）

免疫治疗响应研究（PD-1/PD-L1抑制剂）

培养特性

生长方式：贴壁生长，形态呈多边形或铺路石样

倍增时间：约30-48小时

培养基需求：RPMI-1640 + 10% FBS

核心研究方向

靶向治疗

EGFR-TKI测试：

吉非替尼/奥希替尼敏感性（IC50预测）

T790M/C797S耐药突变检测

免疫微环境：

与PBMC共培养（效靶比1:10）

转移机制

3D侵袭模型：

Matrigel浓度梯度实验

EMT标志物检测（E-cadherin/Vimentin）

实验设计

动物模型

原位移植：肺内注射（成功率40-60%）

PDX模型：第三代基因组验证

技术延伸

单细胞测序：解析肿瘤异质性

类器官培养：添加Wnt3a/R-spondin1

培养条件：

培养条件

传代：0.25%胰酶消化3-5分钟

冻存：程序降温冻存液

质控

STR分型：比对ATCC数据库

支原体检测：每月MycoAlert

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。