NCIH1341人小细胞肺癌细胞

NCIH1341人小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性

组织来源:肺

生长特性:悬浮生长

细胞形态:圆形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:F12 + 10%FBS + 0.02 mg/mL Insulin + 0.01 mg/mL transferrin + 25 nM sodium selenite + 50 nM Hydrocortisone + 1 ng/mL Epidermal Growth Factor (do not filter) + 0.01 mM ethano⳰ꐠ⳰

细胞特性：

来源与分类

组织类型：人小细胞肺癌（SCLC），高级别神经内分泌癌

分子特征：

标志性突变：TP53/RB1双缺失（SCLC典型特征）

神经内分泌标记：Synaptophysin+/Chromogranin A+（建议免疫荧光验证）

MYC状态：可能扩增（与侵袭性相关，需FISH检测）

研究价值：

化疗耐药机制研究（依托泊苷/顺铂方案）

神经内分泌-非神经内分泌可塑性研究

培养特性

生长方式：悬浮聚集生长（偶见半贴壁）

倍增时间：约18-24小时（需实验校准）

特殊需求：建议添加10nM β-巯基乙醇（减少氧化应激）

培养条件：

培养体系

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% Sodium Pyruvate

传代要点：

40μm细胞筛过滤破碎团块（维持单细胞悬液）

维持密度2-6×10? cells/mL（高密度诱发凋亡）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对ATCC CRL-5812）

支原体检测（每月MycoAlert? PLUS）

功能验证：

软琼脂克隆形成实验（评估致瘤性）

核心研究方向

治疗抵抗机制

化疗耐药模型：

低剂量顺铂（0.5μM）长期暴露诱导耐药

耐药标志物：ERCC1过表达或SLFN11缺失

靶向治疗：

PARP抑制剂（奥拉帕尼）敏感性测试（BRCAness表型）

转移与微环境

血行转移模型：

尾静脉注射后显微CT监测肝/脑转移（4-6周）

免疫逃逸：

PD-L1动态表达检测（IFN-γ刺激前后对比）

实验设计建议

动物模型

原位移植：

小鼠肺内注射（立体定位仪引导，成瘤率50-70%）

监测：血清NSE（神经元特异性烯醇化酶）水平

PDX模型：

第二代全基因组测序验证遗传稳定性

技术延伸

单细胞测序：

解析治疗前后的亚群异质性（如ASCL1+/NEUROD1+亚群）

代谢分析：

Seahorse检测糖酵解与OXPHOS依赖程度

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。