NCIH1155人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

细胞特性

种属来源:人

性别年龄:36岁,白人男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +5% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞背景与特性

组织来源

源自非小细胞肺癌（NSCLC）患者，病理亚型需验证（倾向大细胞癌）

转移特性：可能具有脑转移倾向（需体内实验验证）

分子特征

驱动基因：

KRAS突变（G12V/D常见，需测序确认）

TP53失活突变（＞80%概率）

ROS1/ALK阴性（排除靶向治疗交叉反应）

免疫特征：

PD-L1表达水平可变（建议流式检测）

MHC-I表达下调（影响免疫治疗响应）

2. 标准培养条件

参数  推荐条件  关键注意事项

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  添加1mM丙酮酸钠（增强代谢）

生长形态  贴壁生长，多边形上皮样  易成岛状聚集，需胶原酶辅助消化

传代比例  1:3~1:5（80%融合时）  胰酶消化时间≤5分钟（37℃）

冻存方案  90% FBS + 10% DMSO  程序降温：4℃→-80℃→液氮

3. 核心验证实验

KRAS突变检测

Sanger测序：

引物覆盖KRAS外显子2（G12/13热点）

预期峰图：GGT→GTT（G12V）或GAT（G12D）

PD-L1动态表达

流式细胞术：

抗体：抗PD-L1-PE（克隆MIH1）

IFN-γ（20ng/mL）刺激24h后检测表达变化

转移潜能评估

Transwell实验：

基质胶涂层（模拟基底膜侵袭）

检测MMP-2分泌（明胶酶谱法）

4. 研究应用方向

靶向耐药机制

KRAS抑制剂：Sotorasib（AMG510）敏感性测试

合成致死策略：联合MEK抑制剂（Trametinib）

免疫微环境

类器官共培养：

与肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）共培养

检测IL-10/TGF-β分泌（ELISA）

脑转移模型

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