NB16人神经母细胞瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:女性，2年11个月

组织来源:骨髓

生长特性:悬浮生长

细胞形态:单个圆形细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 15% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:2-1:4传代, 每周传1代

1. 细胞背景与特性

组织来源

源自儿童肾上腺神经母细胞瘤（MYCN非扩增型）

临床分期：可能为高风险型（需验证HR基因特征）

分子特征

遗传变异：

1p36缺失（>70%病例）

ALK激活突变（需测序验证R1275Q/F1174L热点）

11q不平衡缺失（染色体分析确认）

分化标志物：

低表达TH（酪氨酸羟化酶）

高表达NCAM（CD56）

2. 标准培养条件

参数  推荐条件  关键注意事项

培养基  RPMI-1640 + 15% FBS  需添加1×ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒）

生长形态  半贴壁/悬浮混合  传代时保留部分条件培养基

传代比例  1:3~1:5（聚集直径<200μm）  采用Accutase?消化（37℃,10min）

冻存液  90% FBS + 10% DMSO +5%葡萄糖  程序降温速率：-1℃/min

3. 核心鉴定实验

MYCN状态确认

FISH：MYCN/CEP2比值<2（非扩增型）

qPCR：MYCN mRNA表达量应低于IMR-32细胞系

致瘤性验证

裸鼠原位模型：

肾上腺包膜下注射（5×10? cells/鼠）

4周后微型MRI检测原发瘤/转移灶

4. 研究应用方向

分化治疗研究

维甲酸（ATRA）处理：

浓度梯度：1-10μM

检测Neurite突起长度变化（ImageJ分析）

靶向治疗开发

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