MOLM16人白血病细胞

MOLM16人白血病细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:77 岁，女性

组织来源:外周血

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:1640+ 20% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

细胞特性：

来源与分类

组织类型：人急性髓系白血病（AML），源自复发患者外周血

分子特征：

标志性突变：FLT3-ITD阳性（需测序验证内部串联重复）

免疫表型：CD33+/CD34+（髓系祖细胞标志）

染色体异常：可能伴NPM1突变或MLL重排

研究价值：

FLT3抑制剂耐药机制研究（如吉瑞替尼）

白血病干细胞（LSC）特性分析

培养特性

生长方式：悬浮生长，聚集成团

倍增时间：约24-36小时（需实验校准）

培养基需求：RPMI-1640 + 20% FBS（高血清支持增殖）

2. 核心研究方向

靶向治疗开发

FLT3通路干预：

吉瑞替尼（Gilteritinib）剂量响应曲线（IC50预测1-10nM）

耐药机制：AXL激活或FLT3-TKD二次突变检测

联合治疗策略：

FLT3抑制剂与BCL-2抑制剂（Venetoclax）协同效应

白血病干细胞研究

体外模型：

甲基纤维素克隆形成实验（含SCF/IL-3/IL-6）

低氧培养（5% O?）模拟骨髓微环境

体内模型：

NSG小鼠尾静脉注射（1×10? cells/鼠）构建全身浸润模型

3. 培养规范与质控

培养体系

基础培养基：RPMI-1640 + 20% FBS + 1% GlutaMAX

传代要点：

轻柔吹打避免细胞团破碎（建议使用宽口吸头）

维持密度2-5×10? cells/mL（低于1×10?防凋亡）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对DSMZ ACC-777）

FLT3-ITD突变定期验证（PCR+毛细管电泳）

功能验证：

流式检测CD34+/CD38-干细胞亚群占比

4. 实验设计建议

动物模型

PDX模型：

骨髓腔注射（胫骨内接种，成瘤率>80%）

监测：外周血流式检测人CD45+细胞比例

药物测试：

吉瑞替尼（30mg/kg/day，口服）治疗响应评估

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。