MeWo人黑素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:78 岁,白人男性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:EMEM +10% fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基础特征

来源与分类

组织来源：人皮肤转移性黑色素瘤（源自淋巴结转移灶）

分子特征：

基因型：BRAF野生型（典型NRAS突变型，需测序验证Q61R/L）

标志物：S100+/HMB-45+/Melan-A+（通过免疫荧光确认）

转移特性：高侵袭性（可检测MMP-2/9分泌水平）

研究价值：

NRAS突变型黑色素瘤的典型模型

免疫治疗耐药机制研究（PD-L1表达通常阴性）

培养特性

生长方式：贴壁生长，形态为梭形或多角形

倍增时间：约30-36小时（需实验校准）

培养基需求：对血清质量敏感（建议使用优质FBS）

2. 核心研究方向

靶向治疗开发

NRAS通路干预：

MEK抑制剂（曲美替尼）与CDK4/6抑制剂（帕博西尼）联用方案

耐药机制：ERK信号再激活检测（Western blot）

免疫治疗探索：

与TILs（肿瘤浸润淋巴细胞）共培养（效靶比1:10）

溶瘤病毒（如T-VEC）感染效率测试

转移机制研究

3D侵袭模型：

基质胶浓度梯度（30-70% Matrigel）

关键调控因子：NEDD9介导的侵袭（siRNA敲降实验）

3. 培养规范与质控

培养体系

基础培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA

传代优化：

消化条件：0.25%胰酶-EDTA + 0.1%胶原酶IV（5分钟，37℃）

传代比例：1:3至1:5（依据细胞状态调整）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对ATCC HTB-65标准）

支原体检测（每月MycoAlert? PLUS）

功能验证：

划痕实验（迁移速率≥24小时闭合80%）

4. 实验设计建议

动物模型

原位移植：

小鼠尾静脉注射（1×10? cells/鼠）模拟血行转移

监测：活体成像系统（Luciferase标记）

PDX模型：

皮下接种成瘤率＞90%（需联合Matrigel）

技术延伸

单细胞测序：

聚焦MITF-low/AXL-high耐药亚群

代谢分析：

Seahorse检测氧化磷酸化依赖程度

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