MESSA/Dx5人子宫癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:56 岁，白人女性

组织来源:子宫

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:McCoy's 5a+10% fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞背景与特性

组织来源

源自人子宫肉瘤（具体亚型需验证，可能为未分化子宫内膜肉瘤）

是MES-SA细胞的多药耐药（MDR）亚系，通过逐步增加阿霉素（Doxorubicin）浓度筛选获得

核心特征

耐药机制：

高表达P-糖蛋白（P-gp/MDR1/ABCB1），介导药物外排

对多种化疗药耐药（阿霉素、长春新碱、紫杉醇等）

分子标志物：

间叶组织标志物（Vimentin+）

上皮标志物（E-cadherin-，符合肉瘤特征）

2. 标准培养条件

参数  推荐条件  关键注意事项

培养基  McCoy's 5A + 10% FBS  添加1%青霉素-链霉素（防污染）

生长形态  贴壁生长，梭形/星形  易成束状排列，需充分消化

传代比例  1:3~1:5（80%融合时）  耐药性维持需定期阿霉素刺激

消化方法  0.25%胰酶-EDTA（37°C, 5-7min）  消化后立即用含血清培养基中和

3. 关键操作技术

耐药性维持

每2-3代用0.1 μM阿霉素处理24小时（防止P-gp表达丢失）

冻存液需含0.05 μM阿霉素（保持耐药表型）

P-gp功能验证

流式检测：

使用P-gp抗体（如UIC2）标记

罗丹明123（Rh123）蓄积实验（P-gp活性抑制剂维拉帕米作对照）

逆转耐药实验

细胞接种于96孔板（1×10? cells/孔）

处理组：化疗药（如阿霉素） + P-gp抑制剂（如维拉帕米10 μM）

CCK-8法检测72小时存活率

4. 研究应用方向

耐药机制研究

MDR1启动子甲基化分析（甲基化特异性PCR）

转运蛋白抑制剂筛选：第三代P-gp抑制剂（Tariquidar）

联合治疗策略

纳米载药系统：脂质体阿霉素（规避P-gp外排）

表观遗传调控：HDAC抑制剂（如伏立诺他）下调MDR1

体内模型

皮下成瘤：5×10cells/鼠（耐药组需持续阿霉素腹腔注射）

肺转移模型：尾静脉注射检测耐药细胞侵袭性

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