LU65B人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:64 岁

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基础信息

来源与分类

组织类型：人非小细胞肺癌（NSCLC），可能为肺腺癌或鳞癌亚型（需进一步验证）

分子特征：

驱动基因：需通过NGS检测（重点关注EGFR/KRAS/ALK/ROS1突变）

免疫特征：PD-L1表达水平待定（建议使用22C3抗体检测）

研究价值：

适用于东亚人群肺癌研究（可能与吸烟史相关）

潜在耐药模型（如对奥希替尼或克唑替尼的耐药机制）

2. 核心研究方向

方向一：靶向治疗开发

EGFR/ALK靶点验证：

若存在EGFR敏感突变（如19del/L858R），测试奥希替尼敏感性（IC50范围通常0.1-10nM）

ALK融合检测（FISH或IHC）及相应抑制剂（如阿来替尼）响应实验

免疫治疗探索：

通过流式细胞术分析PD-L1动态表达（推荐克隆号28-8）

类器官-免疫细胞共培养模型（与PBMC比例1:2）

方向二：转移与微环境

3D侵袭模型：

基质胶浓度建议50%（Corning? Matrigel）

添加HGF（20ng/mL）或TGF-β（5ng/mL）增强侵袭性

关键通路：

MET扩增检测（FISH验证）及下游信号（p-MET/p-ERK）分析

3. 培养规范与质控

培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% GlutaMAX（推荐）

传代要点：

消化时间：0.25%胰酶-EDTA处理5分钟（密切观察细胞形态）

接种密度：2×10? cells/cm2（避免生长停滞）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对DSMZ或JCRB数据库）

支原体检测（每月PCR，推荐MycoAlert?试剂盒）

功能验证：

软琼脂克隆形成实验（评估致瘤性）

4. 实验设计建议

动物模型

皮下成瘤：

接种量：5×10? cells/鼠（Matrigel 1:1混合）

成瘤时间：约4-6周（监测肿瘤体积≥100mm3）

PDX模型：

传代稳定性检测（建议≤第5代）

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