LU65A人非小细胞肺癌细胞

LU65A人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:64 岁

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI1640 ++10% fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞背景与特性

（1）基本特征

组织来源：

源自非小细胞肺癌患者（具体亚型需查原始文献，可能为腺癌或鳞癌）。

分子标志物：

常见NSCLC驱动基因突变（如EGFR、KRAS、ALK等，需测序确认）。

可能表达PD-L1（免疫治疗潜在靶点）。

（2）研究应用

靶向治疗耐药机制（如EGFR-TKI耐药）。

免疫治疗响应（PD-1/PD-L1阻断效果评估）。

转移机制（EMT、侵袭性研究）。

2. 培养条件与传代

（1）基础培养参数

参数  推荐条件

培养基  DMEM或RPMI-1640 + 10% FBS

生长形态  贴壁生长（可能需胶原酶消化）

传代比例  1:3~1:6（80%融合时操作）

消化方法  0.25%胰酶-EDTA（37°C，3-5分钟）

（2）关键注意事项

贴壁稳定性：部分NSCLC细胞贴壁较慢，可预涂胶原蛋白（1-5 μg/cm2）。

支原体防控：定期检测（如PCR法），污染时用**Plasmocin?（5 μg/mL）**处理。

冻存：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。

3. 研究应用

（1）靶向治疗研究

EGFR突变型：测试吉非替尼（Gefitinib）、奥希替尼（Osimertinib）的敏感性。

ALK融合：评估克唑替尼（Crizotinib）的抑制效果。

耐药机制：如MET扩增、T790M突变等。

（2）免疫治疗评估

PD-L1表达检测（流式或IHC）。

共培养实验：与T细胞共孵育，评估PD-1抗体（如Pembrolizumab）的杀伤效应。

（3）转移与侵袭

Transwell实验：检测MMP-2/9活性或EMT标志物（E-cadherin、Vimentin）。

动物模型：构建原位移植瘤（肺内注射）或尾静脉转移模型。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。