Lu143人小细胞肺癌细胞

Lu143人小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:60 岁，男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基础特征

来源与病理学背景

组织来源：人小细胞肺癌（SCLC）原发灶或转移灶，属高级别神经内分泌肿瘤

分子特征：

标志物阳性：Synaptophysin（Syn+）、CD56（NCAM+）、TTF-1（核表达）

基因变异：存在TP53和RB1共缺失（SCLC典型特征），可能伴MYC家族基因扩增

增殖特性：悬浮聚集生长，倍增时间约18-24小时（高侵袭性）

研究价值

临床前模型：模拟SCLC对铂类/依托泊苷的快速耐药性

转化医学：适用于DLL3靶向药物（如Rova-T）的疗效评估

2. 核心研究方向与实验设计

方向一：靶向治疗开发

神经内分泌靶点：

通过流式细胞术定量DLL3膜表达（阳性阈值>30%）

测试B7-H3（CD276）抗体偶联药物的敏感性

表观遗传干预：

EZH2抑制剂（他泽司他）联合化疗的协同效应测试

方向二：转移机制研究

脑转移模型：

与血脑屏障模型（hCMEC/D3细胞）共培养

关键调控因子：L1CAM介导的跨内皮迁移实验

类器官构建：

基质胶浓度40% + 添加SCLC培养基（含10nM Y-27632）

方向三：免疫微环境

免疫检查点分析：

PD-L1（SP142抗体）与CD47共表达检测

巨噬细胞吞噬实验（使用THP-1衍生M2型巨噬细胞）

3. 培养规范与质控标准

培养体系

培养基：改良RPMI-1640（含2.5g/L葡萄糖） + 10% FBS + 1%丙酮酸钠

传代要点：

轻柔吹打避免细胞团破碎（建议使用1000μL宽口枪头）

维持密度5×10? - 1×10? cells/mL（低于2×10?防止酸中毒）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对JCRB或ATCC数据库）

神经内分泌标志物（CgA/Syn）免疫细胞化学验证

支原体检测（推荐MycoAlert PLUS试剂盒）

4. 实验技术延伸

动物模型

原位成瘤：

NSG小鼠气管内注射（5×10? cells/50μL PBS）

监测：micro-CT每周扫描肺部结节

PDX模型：

移植成功率>70%（需联合Matrigel）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。