BEL7404人肝癌细胞

                                                BEL7404人肝癌细胞

细胞系背景

来源：由中国科学院上海细胞生物学研究所于1970年代从一名50岁男性肝癌患者的手术样本中建立。

组织学类型：肝细胞癌（HCC，Hepatocellular Carcinoma）。

典型应用：

肝癌增殖、侵袭和转移机制研究。

抗肿瘤药物（如索拉非尼、仑伐替尼）敏感性测试。

肝癌靶向治疗（如VEGFR、EGFR抑制剂）及免疫治疗（PD-1/PD-L1）研究。

细胞特性：

种属来源:人

性别年龄:智人

组织来源:肝脏

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI-1640+10% fetal bovine serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

分子特征与基因变异

1）关键基因突变与信号通路

p53突变：常见于肝癌，导致基因组不稳定性。

Wnt/β-catenin通路激活：与肝癌增殖和耐药相关。

MET过表达：可能影响侵袭性。

AFP（甲胎蛋白）阳性：典型的肝癌生物标志物。

（2）其他分子标记

CK18（细胞角蛋白18）阳性：证实上皮来源。

Albumin（白蛋白）低表达：分化程度较低，恶性程度较高。

培养条件：

1）培养基与培养条件

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素。

生长特性：

贴壁生长，形态呈多边形或梭形。

倍增时间：约 24–36 小时。

可形成紧密克隆，需定期传代（80–90% 融合时）。

（2）关键实验操作

传代方法：0.25% 胰酶 + 0.02% EDTA 消化 1–2 分钟。

冻存：含 10% DMSO 的冻存液，程序降温后液氮保存。

支原体检测：定期进行 PCR 或 Hoechst 33258 染色检测

研究应用举例

（1）药物敏感性测试

传统化疗药物（如顺铂、5-FU）。

靶向药物（如索拉非尼、瑞戈非尼）。

免疫治疗（PD-1抑制剂联合治疗）。

（2）肿瘤生物学研究

迁移与侵袭实验（划痕愈合、Transwell）。

血管生成实验（Tube formation assay）。

裸鼠异种移植模型（皮下或肝原位成瘤）。

（3）分子机制研究

CRISPR-Cas9 基因编辑（敲除关键基因如 MET、β-catenin）。

siRNA/ShRNA 沉默（研究特定通路如 Wnt/β-catenin）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。