A431人表皮鳞状细胞癌细胞

                                                A431人表皮鳞状细胞癌细胞

细胞背景

组织来源：A431细胞系源自一位85岁女性患者的表皮鳞状细胞癌（Epidermoid Carcinoma）组织

组织学类型：皮肤鳞状细胞癌（SCC），是表皮角质形成细胞恶性转化的典型模型

独特特征：以EGFR基因显著扩增和高表达闻名（拷贝数约60万/细胞）

细胞特性：

种属来源:人

性别年龄:85 岁，女性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM + 10% Foetal Bovine Serum+1%P/S

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

基本特性:

EGFR超表达：

EGFR基因扩增（染色体7p12区段扩增）

膜表面EGFR表达量是正常细胞的50-100倍

组成型激活下游MAPK/PI3K通路

其他标志物：

鳞癌标志物：CK5/6、p63强阳性

上皮间质转化（EMT）相关蛋白：E-cadherin低表达

TP53突变（常见于SCC）

研究应用

EGFR信号研究：

EGFR单抗（西妥昔单抗）作用机制

酪氨酸激酶抑制剂（吉非替尼）耐药性研究

肿瘤生物学：

角质形成细胞恶性转化机制

皮肤癌侵袭和转移模型

药物开发：

新型EGFR靶向药物筛选

联合治疗策略（EGFR抑制剂+化疗）

培养条件：

基础培养基：DMEM（高糖）+10%胎牛血清

传代要点：

消化时间：0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA，37℃ 3-5分钟

传代比例：1:4至1:6（每3-4天传代）

冻存方案：

冻存液：90%FBS+10%DMSO

冻存密度：3-5×10? cells/mL

5. 实验注意事项

细胞形态：

典型铺路石样排列

接触抑制不明显（高密度时易堆积）

质量控制：

定期检测EGFR表达水平（流式/WB）

每3个月进行支原体检测

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。