Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 *适合流式细胞检测*

适用范围

用于标记活细胞

产品介绍

Cell Meter™ 近红外膜电位检测试剂盒是一套通过监测线粒体膜电位（ΔΨm）变化来检测细胞凋亡的专业试剂盒。当细胞凋亡发生时，线粒体膜电位崩溃会引发通透性转换孔（mPTP）开放，导致细胞色素C释放至胞质，进而激活下游凋亡级联反应。

本试剂盒采用专利阳离子染料MitoLite NIR™，在正常细胞中可特异性积聚于线粒体（强荧光信号），而在凋亡细胞中因膜电位丧失导致荧光强度显著降低。该检测兼容流式细胞术（FL4通道）和荧光显微成像，并可与其他试剂联用（如碘化丙啶和Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒），实现细胞活力与凋亡的多参数分析。经优化后适用于通过流式细胞术高通量筛选凋亡激活剂或抑制剂。

实验操作步骤

1.使用预温培养基或自选缓冲液将细胞重悬至5×10⁵~1×10⁶ cells/mL。

注：最佳密度需根据细胞系单独优化

2.加入待测化合物诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。

阴性对照：仅加入化合物溶剂

阳性对照：将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中，用 5-50 µM FCCP 或 CCCP 处理 15 至 30 分钟。

注意：CCCP 或 FCCP 可与 MitoLite™ NIR 同时添加。建议通过预实验确定各细胞系合适的浓度

3.将 5 µL 200X MitoLite™ NIR（组分 A）添加到处理过的细胞中。

4.将细胞置于 37 °C、5% CO2 培养箱中孵育 15 至 30 分钟。

注意：对于贴壁细胞，用 0.5 mM EDTA 轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与 MitoLite™ NIR 染料上样溶液孵育前，用含血清的培养基清洗一次。

5. 1000 rpm离心4分钟，使用1 mL Assay Buffer（组分B）或自选缓冲液重悬细胞。

6.使用流式细胞仪通过FL4通道（激发635nm，发射670nm）分析细胞。

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！