HSF(SV40)人真皮成纤维细胞（原代细胞永生化）

HSF(SV40)人真皮成纤维细胞（原代细胞永生化）

 细胞特性:

1） 细胞来源于手术切除的正常包皮组织。

2）细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。

2） 经鉴定细胞纯度高于90%。

4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5）细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。

 1. 基本特性:

来源：正常人真皮组织分离的原代成纤维细胞，经SV40病毒基因修饰后获得永生化。

永生化机制：SV40大T抗原通过结合并抑制抑癌蛋白（如p53、Rb），使细胞绕过衰老限制，获得持续增殖能力。

形态：典型的成纤维细胞样梭形，贴壁生长。

 2. 主要应用:

体外模型研究：用于皮肤老化、伤口愈合、纤维化疾病（如硬皮病）及细胞外基质（ECM）代谢研究。

病毒学：SV40病毒的致癌机制研究。

药物筛选：测试抗纤维化或抗衰老药物的效果。

基因功能研究：通过基因编辑（如CRISPR）探索成纤维细胞功能。

 3. 培养条件:

培养基：DMEM/F12 + 10% FBS + 1%双抗（青霉素/链霉素）。

传代：胰酶消化（0.25% Trypsin-EDTA），接种比例1:2至1:3，每周1-2次。

冻存：含10% DMSO的冻存液，液氮长期保存。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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