HKb-20人肾上皮细胞

HKb-20人肾上皮细胞

 细胞特性:

HEK293细胞的亚型。表达BtR175b(Cry 1Aa receptor)

细胞特性

1） 来源：人肾

2） 形态：上皮样，贴壁细胞

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

 标准培养条件（以HK-2为例）:

培养基：

DMEM/F12（1:110FB1NEAA（非必需氨基酸1青霉素/链霉素。

附加因子：部分实验室添胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS以增强贴壁。

传代：

消化：0.05胰蛋白酶-EDTA（37℃，3-5分钟），轻柔吹打避免聚团。

接种密度：5×10cells/cm2（每3-4天传代）。

冻存：90FB10DMSO，程序降温至-80℃后转入液氮。

 关键实验应用:

疾病模型：

高糖诱导损伤：25-3mM葡萄糖处理48小时模拟糖尿病肾病。

纤维化模型：TGF-β1（ng/mL，24小时）诱导α-SMA表达。

毒性测试：

顺铂（5-2μM）或庆大霉素（1-mg/mL）评估肾小管毒性（检测LDH、ROS）。

极性研究：Transwell培养形成紧密连接（TEER测量）。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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