姬姆萨染色液(10×Giemsastain)

姬姆萨染色液(10×Giemsastain)

产品简介：

吉姆萨染液由天青2与伊红混合而成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。

嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。

BIOISCO Giemsastain以进口的吉姆萨/姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。Giemsastain(10×)的特点在于，由10×Giemsastain储存液和10×磷酸盐缓冲液组成，混合成工作液后使用；亦可以分开使用，即先用Giemsastain染色液染色，再经磷酸盐缓冲液处理，亦可以得到满意的染色效果。

组成：

储存条件：

RT,12个月有效。

自备材料：

1. 载玻片2、蒸馏水或去离子水3、甲醇4、染色架5、显微镜6、0.1～0.5%的乙酸

操作步骤（仅供参考）：

1. 一步法涂片染色1、Giemsastain工作液的配制：按试剂(A):试剂(B)：蒸馏水=1:1:8混合，即取1份的Giemsastain储存液(10×)和1份的磷酸盐缓冲液(10×)加入到8份蒸馏水中充分混匀，即为Giemsastain工作液。配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。3、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加Giemsastain工作液覆盖涂片，室温滴染15～30min。4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。5、干燥、镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒:粉红色

嗜碱性颗粒:紫蓝色

中性颗粒:淡紫色

2. 两步法涂片染色

1. Giemsastain工作液的配制：

按试剂(A):蒸馏水或去离子水=1:4配制Giemsastain工作液，即取1份的Giemsastain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水或去离子水中充分混匀，即为Giemsastain工作液。配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2. 磷酸盐工作液的配制：

按试剂(B):蒸馏水或去离子水=1:4配制配制磷酸盐工作液，1份的磷酸盐缓冲液(10×)加入到4份的蒸馏水或去离子水中充分混匀，即为磷酸盐工作液。

3. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。

4. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加Giemsastain工作液覆盖涂片，室温滴染10～15min。

5. 加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动载玻片，室温静置5～10min。

6. 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

7. 干燥、镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒:粉红色

嗜碱性颗粒:紫蓝色

中性颗粒:淡紫色

1. 组织切片染色

1. Giemsastain工作液的配制：按试剂(A):试剂(B)：蒸馏水=1:1:8混合，即取1份的Giemsastain储存液(10×)和1份的磷酸盐缓冲液(10×)加入到8份蒸馏水中充分混匀，即为Giemsastain工作液。配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2. 新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天，期间应更换1次固定液。

3、3%的重铬酸钾固定1天。

4、流水冲洗16个小时或过夜。

5、按照常规脱水、包埋。

6、切片，厚度约为5μm。

7、常规脱蜡至水。

8、蒸馏水清洗2次，每次约1min。

9、置于含有Giemsastain工作液的染缸内，浸染18～24h。

10、蒸馏水稍微清洗。

11、0.1～0.5%的乙酸洗1～2min。

1. 自来水稍微冲洗。

2. 用无水乙醇迅速脱水3次，每次5～10s。

3. 二甲苯透明。

4. 中性树脂封固。

染色结果：

细胞核:蓝色至紫色

细胞质:淡蓝色

嗜铬细胞胞质:黄绿色

结缔组织:淡红色

注意事项：

1. 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色结果。

2. 涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

3. 如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液的浓度。

4. Giemsa涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染以免影响染色结果。

5. 染色液在稀释后液面应有金属光泽，表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。

6. Giemsa组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%的乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

7. 0.1～0.5%的冰乙酸分化，常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%的冰乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。

8. Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。

9. Giemsa涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可以按Giemsastain储存液：磷酸盐缓冲液(10×)=1：1配制，即取吉姆萨储存液(10×)1份、磷酸盐缓冲液(10×)1份，充分混匀，即为快速吉姆萨染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s后重新加染色液，反复5～10次，其余步骤同上。

10. 染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。

11. Regaud固定液：按3%重铬酸钾水溶液：甲醛=4:1配制，临用前混匀，1～2天后失效。

12. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

13. 使用场所应通风，并远离火源。有效期：24个月

14. 本产品仅供科研使用，严禁它用。