"NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱淋巴母细胞样
【NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK
【背景信息】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱详见相关文献介绍
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
高浓度血清虽然能促进细胞增殖,但也可能带来一些潜在风险。其中最主要的风险是可能诱导细胞分化。血清中含有多种生长因子和激素,这些物质在浓度过高时可能改变细胞的原始特性。特别是对于需要保持未分化状态的干细胞,这种影响尤为显著。因此,在使用高浓度血清时,必须密切监测细胞的形态和标志物表达,确保其特性不发生改变。
【换液周期】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱悬浮生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
对于常规贴壁细胞,标准操作流程应遵循三步原则:首先用PBS润洗去除血清中的酶抑制剂,随后进行胰酶润洗并彻底吸除,最后依靠残留酶在37℃下的短暂作用完成消化。这个过程中,判断消化终点的标准常被错误理解。实际上,当显微镜下观察到细胞层呈现""沙状移动""时,表明细胞-基质和细胞-细胞间的连接均已断裂,此时应立即终止消化。这种状态下的细胞虽未完全离散,但已具备独立分布的特性。值得注意的是,某些肿瘤细胞即使在镜下呈现理想单细胞状态,贴壁后仍会重新聚集,这是由其生物学特性决定的自然现象,强行通过延长消化或剧烈吹打来追求绝对单分散性,只会导致细胞状态持续恶化。
细胞在-196℃液氮环境中,其代谢活动近乎完全停止,理论上可实现无限期保存。冻存过程的核心在于控制冰晶形成:细胞内水分在冻结前需充分透出,避免冰晶刺穿细胞膜。保护剂DMSO(二甲基亚砜)通过降低培养基冰点(可使冰点降至-60℃),同时改变细胞膜磷脂双分子层的相变温度,显著提升细胞存活率。研究表明,10% DMSO浓度可使细胞复苏存活率达90%以上。
【培养观察】
定期观察NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞消化步骤(一):吸弃旧培养基:轻轻倾斜培养皿或培养瓶,用吸管吸弃旧的培养基,注意不要吸走细胞。洗涤细胞:向培养皿中加入适量的PBS,轻轻摇晃以洗涤细胞表面,然后吸弃PBS。这一步是为了去除残留的培养基和代谢产物,以及可能干扰消化的物质。加入胰蛋白酶:根据培养皿或培养瓶的大小和细胞的密度,向其中加入适量的胰蛋白酶溶液。确保胰蛋白酶均匀要盖细胞表面。
常见细胞贴壁较弱原因:在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象,此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养,若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞,尽量避免接触低温或密度过高。
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MKN7细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Panc 1细胞复苏实验室、HS-445细胞复苏实验室、WM266mel细胞复苏实验室
SNU-1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:2-3天换液1次。;生长特性:悬浮聚集;形态特性:上皮细胞;相关产品有:MDA436细胞复苏实验室、U-138MG细胞复苏实验室、U373-MG细胞复苏实验室
DMS 153细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hs852T细胞复苏实验室、CHO细胞复苏实验室、T/G HA VSMC细胞复苏实验室
OUMS23细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LA795细胞复苏实验室、WEHI-164细胞复苏实验室、Panc 03.27细胞复苏实验室
1.1B4细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代;每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;多角形 ;相关产品有:LN-18细胞复苏实验室、GM637A细胞复苏实验室、Human Kidney-2细胞复苏实验室
H-1648细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:OVCAR-3细胞复苏实验室、MLMEC细胞复苏实验室、CPA47细胞复苏实验室
hs 68细胞复苏实验室;背景说明:该细胞1969年由Owens RB建立。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MSB1细胞复苏实验室、MOLP-2细胞复苏实验室、RBL2H3细胞复苏实验室
CD-18细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:B16 melanoma F10细胞复苏实验室、NCIH1573细胞复苏实验室、RAEC细胞复苏实验室
ATDC-5 Cells小鼠成软骨细胞传代性好|STR图谱
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IARC-167 Cells(提供STR鉴定图谱)
LHB-L2 Cells(提供STR鉴定图谱)
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Ubigene HEK293 SLC9B2 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
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HAP1 UBQLN1 (-) UBQLN4 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
SP2-0-Ag14细胞复苏实验室;背景说明:该细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。该细胞不分泌免疫球蛋白,对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤有抗性,对HAT比较敏感;该细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤;鼠痘病毒阴性。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;圆形;相关产品有:KNS-81细胞复苏实验室、Toledo细胞复苏实验室、MHH-CALL2细胞复苏实验室
TGW-nu细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:神经元细胞;相关产品有:SKNEP细胞复苏实验室、OCI Ly10细胞复苏实验室、TE-85细胞复苏实验室
Madin-Darby Canine Kidney细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U-251细胞复苏实验室、CCC-HEL-1细胞复苏实验室、RERF-LC-MS细胞复苏实验室
JM细胞复苏实验室;背景说明:该细胞源自一位14岁患有T淋巴细胞白血病男性的外周血;传代方法:保持细胞密度在3—9×105cells/ml之间,1:5—1:10传代,每周换液2—3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:圆形,单个或呈片;相关产品有:NCI-H929细胞复苏实验室、Pro-5WgaRI3C细胞复苏实验室、GM03190A细胞复苏实验室
H-810细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:6传代,每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:SKRC-42细胞复苏实验室、COLO-320DM细胞复苏实验室、H 9细胞复苏实验室
CHO-K1 Cells仓鼠卵巢细胞传代性好|STR图谱
TM4 Cells小鼠睾丸Sertoli细胞传代性好|STR图谱
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BFTC-905 Cells人膀胱癌细胞传代性好|STR图谱
MeT-5A Cells人间皮细胞传代性好|STR图谱
H-774细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM00637细胞复苏实验室、SKNBE细胞复苏实验室、GB-1细胞复苏实验室
SEG1细胞复苏实验室;背景说明:食管腺癌;胸腔积液转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI H929细胞复苏实验室、MDA-435细胞复苏实验室、Jurkat E6细胞复苏实验室
High-5细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH446细胞复苏实验室、CL-40细胞复苏实验室、HCC-1359细胞复苏实验室
OVCA420细胞复苏实验室;背景说明:卵巢癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H 9细胞复苏实验室、MGH-U1细胞复苏实验室、CEM-CCRF细胞复苏实验室
THP1-HMGB1-Lucia Cells(提供STR鉴定图谱)
LTEP-sm 1细胞复苏实验室;背景说明:小细胞肺癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Mono-Mac-6细胞复苏实验室、UPCI-SCC-090细胞复苏实验室、SNU-475细胞复苏实验室
HCCLM3 Cells人肝癌细胞传代性好|STR图谱
RKO-E6 Cells人结肠癌转基因细胞传代性好|STR图谱
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L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞传代性好|STR图谱
H-810细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:6传代,每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:SKRC-42细胞复苏实验室、COLO-320DM细胞复苏实验室、H 9细胞复苏实验室
GalK 1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Homo sapiens No. 578, breast cells细胞复苏实验室、HEB细胞复苏实验室、WiDr细胞复苏实验室
MDA-MB-231 #4175细胞复苏实验室;背景说明:乳腺癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:REC 1细胞复苏实验室、EBNA293细胞复苏实验室、ROS17/28细胞复苏实验室
HCMEC(BL12-H)细胞复苏实验室;背景说明:结肠微血管;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OVCAR10细胞复苏实验室、NCI-H1404细胞复苏实验室、AMO-1细胞复苏实验室
COC1/CDDP细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UCLA RO-81A-1细胞复苏实验室、IFRS1细胞复苏实验室、DHL-6细胞复苏实验室
H-711细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM03570细胞复苏实验室、SNK1细胞复苏实验室、NIT-1细胞复苏实验室
PK-13 Cells猪肾细胞传代性好|STR图谱
AMO1 Cells人骨髓浆细胞瘤细胞传代性好|STR图谱
9L/lacZ Cells大鼠胶质肉瘤细胞传代性好|STR图谱
ME-180 Cells人子宫颈表皮癌细胞传代性好|STR图谱
NK-92 Cells人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏率高|STR图谱
L Wnt-3A Cells小鼠皮下结缔组织细胞传代性好|STR图谱
OVCAR-8/ADR Cells人卵巢浆液性腺癌细胞传代性好|STR图谱
CCC-HEH-2细胞复苏实验室;背景说明:心肌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK-GT-4细胞复苏实验室、Tn5 B1-4细胞复苏实验室、MESSADX5细胞复苏实验室
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CHP-212细胞复苏实验室、Caco2BBe细胞复苏实验室、MDA330细胞复苏实验室
Hs 281.T细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代,每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:COLO-320-DM细胞复苏实验室、NCM460细胞复苏实验室、ARH-77细胞复苏实验室
SNU-119细胞复苏实验室;背景说明:卵巢癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HL7702细胞复苏实验室、IBRS2细胞复苏实验室、PaCa2细胞复苏实验室
SK Mel28细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:8传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:星形的;相关产品有:USMC细胞复苏实验室、KU 812F细胞复苏实验室、RWPE-2细胞复苏实验室
RMS 1598细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:PC 61.5.3细胞复苏实验室、JJN-3细胞复苏实验室、NCIH1693细胞复苏实验室
MCF10A细胞复苏实验室;背景说明:乳腺;上皮细胞;自发永生;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H647细胞复苏实验室、GP5d细胞复苏实验室、CV-1.K细胞复苏实验室
KE37细胞复苏实验室;背景说明:急性T淋巴细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H2107细胞复苏实验室、J111细胞复苏实验室、M14细胞复苏实验室
IB-RS-2 Cells猪肾细胞传代性好|STR图谱
IHH-4 Cells人甲状腺乳头状癌细胞传代性好|STR图谱
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