"P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
P-19
传代培养是细胞培养技术中的关键环节,其核心目的是维持细胞的健康增殖并获取稳定的实验材料。当细胞在培养瓶中生长至80%-90%汇合度时,细胞间的接触抑制和营养竞争会导致生长速率下降,此时必须通过传代操作将细胞分散并重新接种。这一过程不仅解决了培养空间限制问题,还能通过细胞扩增建立可持续研究的细胞株系。然而值得注意的是,反复传代可能导致细胞表型改变,例如间充质干细胞多次传代后可能出现分化能力下降,因此需严格控制传代次数和操作规范。
在-80℃或-196℃(液氮温度)的条件下,细胞的代谢活动几乎完全停滞,进入“休眠”状态。这种超低温保存技术使得细胞能够长期存储,并在需要时通过复苏恢复活性。例如,在生物医学研究中,许多实验室会利用液氮罐保存珍贵的细胞系,以便后续实验使用。
【背景信息】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞消化具体操作如下:先用PBS缓冲液冲洗细胞表面1-2次,每次10ml,以去除残留的血清和代谢废物。冲洗后弃去PBS液。向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1ml。将细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。消化时间需根据细胞类型和环境温度灵活调整,通常为1-3分钟。消化过程中可轻轻晃动培养瓶,以促进细胞脱落。当显微镜下观察到细胞间隙增大、细胞变圆并开始脱落时,即可终止消化。加入10ml细胞培养液以中和胰蛋白酶的活性,避免过度消化对细胞造成损伤。
细胞培养应用于分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等领域,细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出,然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离,也可以来源于已建立的细胞系。传代培养是指当细胞生长至高密度时,将其分殖至新的培养瓶中,以维持其生长和增殖。贴壁细胞是指在培养基表面附着生长的细胞,悬浮细胞是指在培养基中悬浮生长的细胞,不依附于培养皿表面。半贴壁半悬浮细胞同时具备贴壁细胞和悬浮细胞的特点,通常在培养基中部分附着生长,部分悬浮于培养基上。
【物种来源】
P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化P19 Cells小鼠畸胎瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞消化准备工作:预热试剂:在开始细胞消化之前,确保胰蛋白酶溶液和完全培养基已经预热至37℃,以减少对细胞的温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶溶液、PBS(磷酸盐缓冲液)和完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于适宜消化的状态,通常是在细胞达到约80%-90%的融合度时。
瓶装500ml血清的解冻需要采用逐步升温的""阶梯式解冻法"",这是保证血清质量的关键步骤。具体操作流程如下:首先将血清从–20℃或–70℃转移至4℃冰箱,缓慢溶解24小时。这一低温过渡阶段可以让血清中的各种成分逐渐适应温度变化,避免突然的温度波动导致蛋白质变性。待血清完全溶解后,再将其移至室温环境使其完全解冻。在解冻过程中,需要每隔2-3小时轻轻摇晃瓶身,使血清各部分的温度和成分均匀分布,这一操作能显著减少沉淀物的形成。但需特别注意摇晃力度,避免产生气泡,因为气泡可能导致血清中的蛋白质变性。
SHIN-3 Cells;背景说明:卵巢浆液性囊腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Ball 1细胞、N2a细胞、HTR8细胞
SRA01/04 (HLE) Cells;背景说明:晶状体;上皮细胞;SV40转化;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
Hs274T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代,每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
SKMEL-31 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞
MDAMB468 Cells;背景说明:该细胞是1977年由CailleauR等从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供体组织的G6PD等位基因杂合,但此细胞株始终表现为G6PDA表型。P53基因273位密码子存在G→A突变,从而导致Arg→His替代。每个细胞上存在1×106个EGF受体。;传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HT1080细胞、BC-023细胞、IM9细胞
HAP1 AP1G1 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 SLC25A33 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
MDCK.2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞
EFO27 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH2171细胞、H1417细胞、Balb/c 3T3细胞
DU_145 Cells;背景说明:DU 145 是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性,酸性酶阳性,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:ETCC-007细胞、FT-293细胞、RCC 7860细胞
HCC1419 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞
CHO-S Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OPM-2细胞、NTera2 cl.D1细胞、KMB17细胞
EnCa1 Cells;背景说明:内膜腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
Chang Cells Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
MKN45 Cells;背景说明:该细胞系由S Akiyama建立,源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁+悬浮;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
i28cNF Cells(提供STR鉴定图谱)
LEIi008-A Cells(提供STR鉴定图谱)
NB1-G Cells(提供STR鉴定图谱)
PA-JEB/beta4-EGFP Cells(提供STR鉴定图谱)
S/BR Cells(提供STR鉴定图谱)
TRD-24 Cells(提供STR鉴定图谱)
UKERi004-A Cells(提供STR鉴定图谱)
HEV0080 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCI.H23 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3传代;3-4天1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞
H1793 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代 ;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
EBNA-293 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:10传代;每周2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞
EL4 Cells;背景说明:EL4是从用9,10-二甲基-1,2-并蒽在C57BL小鼠中诱导的淋巴瘤中建立的。 能抗0.1 mM 化可的松,对20 mcg/ml PHA敏感。 还有一个亚株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞
HTR-8/SV-neo Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
HTR-8/SV-neo Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
SF-539 BT Cells;背景说明:胶质瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SCL1细胞、Liver-02细胞、RMC细胞
HASMC Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞
C38 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:SUDHL1细胞、NCI-H441-4细胞、RBL 2H3细胞
FO [Mouse myeloma] Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞
hTERT RPE1 Cells;背景说明:视网膜色素上皮;hTERT永生;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞
HUC Cells;背景说明:尿道;上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:FK81细胞、HuT78细胞、OSK-1细胞
LLC-MK2 Cells;背景说明:胚胎;肾;自发永生;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
HPAF Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞
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