"Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。
【Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
HEPA 1-6; Hepa-1-6; Hepa1-6
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性：一般进实验室都有师兄师姐带着做，他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则，如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作，在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞，细胞有时真的很脆弱，最好每天都去看看它，以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象，也好及时解决这些意外，避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种：细胞要分批传代，这样即使有一批出了问题，还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库，细胞系体外培养，它们会成长为单层细胞，附着或紧贴在培养瓶上，或悬浮在体外的溶液中，细胞系复苏周期短，公司细胞系状态良好，饱满，有光泽等优点。EDTA的作用：许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白，胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于整联蛋白的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话)，而应该想其它办法。
【背景信息】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱此细胞株源自C５７/L小鼠中引发的BW７７５６肝癌；表达AFP、α１抗胰蛋白酶、淀粉酶；鼠痘病毒阴性。此细胞可以在无血清的培养基中繁殖，培养基成分是：DMEM,７５%;Waymouth＇sMAB８７/３培养基，２５%。添加３x１０-８M。
【传代比例】
1:2-1:4(Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货：Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)
细胞消化具体操作如下：先用PBS缓冲液冲洗细胞表面1-2次，每次10ml，以去除残留的血清和代谢废物。冲洗后弃去PBS液。向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液，每瓶1ml。将细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。消化时间需根据细胞类型和环境温度灵活调整，通常为1-3分钟。消化过程中可轻轻晃动培养瓶，以促进细胞脱落。当显微镜下观察到细胞间隙增大、细胞变圆并开始脱落时，即可终止消化。加入10ml细胞培养液以中和胰蛋白酶的活性，避免过度消化对细胞造成损伤。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。
【物种来源】
Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）
【污染防控】
严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化Hepa 1-6 Cells小鼠肝癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤（二）：终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时，向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞，使其形成均匀的细胞悬液。然后，将细胞悬液转移至无菌离心管中，以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后，轻轻倒掉上清液，用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要，将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
胰蛋白酶的发现使屈内成为首次发现“一种能够降解蛋白质的酶(即胰蛋白酶)”的科学家，并首次提出了酶(Enzyme)的概念。在那个时期，科学家们开始研究酶在生物体中的作用，并尝试将其应用于实验室研究中。随着研究的深入，科学家们逐渐认识到胰酶在细胞传代中的潜在应用。经过大量的实验和研究，探索胰酶的最佳使用条件、浓度和作用时间等参数，以确保其在细胞传代中的有效性和安全性。经过不断的努力和改进，胰酶在细胞传代中的应用逐渐得到了完善和优化。如今，胰酶已成为细胞培养技术中不可或缺的工具之一，广泛应用于生物医学研究、药物开发和工业生产等领域。需要注意的是，虽然胰酶在细胞传代中发挥着重要作用，但其使用也需要遵循一定的规范和注意事项。
PBMC Cells;背景说明：外周血单核 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞
Ej138 Cells;背景说明：膀胱癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
NCI-H2087 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２次。;生长特性：悬浮生长，有少数细胞疏松贴壁;形态特性：上皮样;相关产品有：SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
Hs 695.T Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：HSC6细胞、IBRS-2细胞、CHL-11细胞
ARO 81-1 Cells;背景说明：甲状腺癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
GM20670 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 KCNK2 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
LWnt-3A Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞
MB49 Cells;背景说明：膀胱癌；雄性；C５７BL/Icrfa(t);传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
T-ALL1 Cells;背景说明：该细胞源于一名复发T-ALL（急性T淋巴细胞性白血病）的儿童的外周血；具有很强的细胞毒性，体内体外实验中都能破坏肿瘤细胞；IL-２可使细胞更好地生长；α/β TCR阳性，γ/δ TCR阴性；可产生IFNγ、TNF-α和GM-CSF。;传代方法：维持细胞密度在４×１０５-１×１０６ cells/ml之间，２-３天换液１次 ;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：RS(4;11)细胞、HFE-145细胞、SKMel-5细胞
HO-8910PM Cells;背景说明：高转移卵巢癌 Cells;传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
Wayne State University-Head and Neck 13 Cells;背景说明：舌鳞癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
32D clone3 Cells;背景说明：骨髓淋巴瘤；C３H/HeJ;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
NCI-H295R Cells;背景说明：肾上腺皮质癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：OCI-LY-8细胞、MIA-PaCa-2细胞、NCI-H1954细胞
OEC19 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞
HPS2109 Cells(提供STR鉴定图谱)
JUCTCi014-A Cells(提供STR鉴定图谱)
MDCK-II Rab14-KO Cells(提供STR鉴定图谱)
NDi002-A Cells(提供STR鉴定图谱)
PT [Pig] Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene A-549 SERPINE1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
UW28 Cells(提供STR鉴定图谱)
HEV0401 Cells(提供STR鉴定图谱)
CNE2Z Cells;背景说明：鼻咽癌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LOU-NH-91细胞、COS-1细胞、CNE细胞
HCC1419 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞
MES23.5 Cells;背景说明：多巴胺能神经元 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
MCF7-CTRL Cells;背景说明：MCF-７细胞保留了多个分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物（domes）。该细胞含有Tx-４癌基因。肿瘤坏死因子α（TNFalpha）可以抑制MCF-７细胞的生长。抗雌激素处理细胞能调变IGFBP＇S的分泌。;传代方法：１：２传代，３-４天长满;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
RPMI 8226/S Cells;背景说明：来源于一位６１岁的男性浆细胞瘤患者；可产生免疫球蛋白轻链，未检测到重链。;传代方法：按１：２传代，５-６小时可以看到细胞分裂;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
RPMI 8226/S Cells;背景说明：来源于一位６１岁的男性浆细胞瘤患者；可产生免疫球蛋白轻链，未检测到重链。;传代方法：按１：２传代，５-６小时可以看到细胞分裂;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
Tsup-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２-３天换液１次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞样 ;相关产品有：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞
RKOE6 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
PK136 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
SK-N-BE(2)C Cells;背景说明：神经母细胞瘤；骨髓转移；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MDA-MB157细胞、NCI-H64细胞、J-111细胞
RPMI 1788 Cells;背景说明：B淋巴细胞；EBV转化;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
RPMI 2650 Cells;背景说明：头颈鳞癌；胸腔积液转移；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞
786.O Cells;背景说明：该细胞源自一位原发性肾透明细胞癌患者。该细胞有微绒毛和桥粒，能在软琼脂上生长。此细胞生成一种PTH（甲状旁腺素）样的多肽，与乳癌和肺癌中生成的肽相似，其N端序列与PTH相似，具有PTH样活性，分子量为６０００D。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞
HCC-1806 Cells;背景说明：该细胞源自一位患有乳腺髓样癌的４４岁黑人女性，表达WNT７B癌基因，细胞与细胞边界处有细胞桥粒、微绒毛、张力细丝。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞
NUGC-3 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
NCM460 Cells人正常结肠上皮细胞|有STR图谱
WM266-4 Cells人黑素瘤细胞|有STR图谱
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HCC827-luc Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
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G422-Luc Cells小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤细胞|有STR图谱
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