LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

LLC-WRC256; Walker/LLC-WRC 256; Walker-256; Walker-Ca.256; Walker 256; W256; Lilly Laboratories Culture-Walker Rat Culture 256

烘箱（干燥箱）的干热灭菌功能对玻璃器皿至关重要。鼓风式设计确保160℃高温下热量均匀分布，但操作中存在三个技术要点：一是必须同步启动鼓风与加热功能，避免局部过热；二是100℃以下才能开启箱门，防止玻璃器皿因骤冷破裂；三是需使用耐高温牛皮纸包裹器械，普通棉质材料在高温下碳化产生的微粒可能影响细胞贴壁。有新研发的真空烘箱将灭菌时间缩短30%，同时降低能源消耗。

细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时，细胞内的游离水会形成冰晶，导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤，最终引发细胞死亡。然而，通过添加冷冻保护剂（如二甲亚砜或甘油），可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率，并减少低温对细胞结构的破坏。

【背景信息】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍

【传代比例】

1:2-1:4(LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

无菌操作是预防污染的核心。以下是一些关键的无菌操作要点：实验前用75%酒精擦拭超净工作台台面，并开启紫外灯照射20-30分钟。操作时关闭紫外灯，开启风机，避免气流干扰。实验人员需穿戴无菌实验服、口罩和手套，并避免在操作过程中说话或咳嗽，以减少飞沫污染。所有打开的试剂瓶和培养瓶应倾斜放置，避免垂直开口暴露于空气中。使用后的移液枪头等废弃物应及时清理，避免交叉污染。

细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。

【物种来源】

LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化LLC-WRC 256 Cells大鼠腹水癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

细胞传代准备工作：预热培养基和PBS:在开始传代前，将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS)，预热至37℃，以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态，确保细胞处于对数生长期且状态良好。

直接倒掉上清液能够提高操作效率，节省时间。但这种方式存在一定风险，直接倾倒时较难控制力度和角度，如果操作不慎，容易使细胞沉淀随着上清液一起流出，导致细胞损失，而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中，应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时，建议优先采用移液枪吸走的方式，以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下，可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法，在保证实验质量的同时提高工作效率。

Y3M Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HCCLM3细胞、DiFi细胞、DHL8细胞

H1734 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：H-250细胞、211H细胞、BE2C细胞

TKB-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞

3T3 Cells;背景说明：３T３细胞株是１９６２年Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的；该细胞的生长受接触性抑制，汇合状态的单层细胞密度为４００００个细胞/平方厘米；检测结果显示该细胞鼠痘病毒阴性；在中生长较好，在某些玻璃表面上可能状态不佳；细胞生长饱和时其密度可以达到约５００００ cells/cm２。;传代方法：１：３传代；３-４天１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维细胞样;相关产品有：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞

HOP 62 Cells;背景说明：肺癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞

HAP1 ADAR (-) ADARB1 (-) Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 SFR1 (-) 5 Cells(提供STR鉴定图谱)

U-343 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞

CCD-841-CoN Cells;背景说明：结肠上皮细胞；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞

CTLL2 Cells;背景说明：该细胞是源自C５７BL/６的细胞毒性的T淋巴细胞。其生长以来IL-２。;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞

293T Cells;背景说明：２９３细胞株插入SV４０T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为２９３T。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞

SO-Rb 50 Cells;背景说明：视网膜母细胞瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞

MHH-CALL-2 Cells;背景说明：急性B淋巴细胞白血病；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞

YES2 Cells;背景说明：食管鳞癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞

C3H/10T1/2-clone8 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞

HyCyte HT-29 KO-hTIMM17B Cells(提供STR鉴定图谱)

LCL Orang Asli K16 Cells(提供STR鉴定图谱)

N1511 Cells(提供STR鉴定图谱)

OVC.ID.12 Cells(提供STR鉴定图谱)

RSN Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene HeLa PIAS2 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

XP1MI 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 TMED5 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

HCC 70 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞

HEL-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞

Hs_578t Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞

MADB106 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞

SNU1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２-３天换液１次。;生长特性：悬浮聚集;形态特性：上皮细胞;相关产品有：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞

SNU1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２-３天换液１次。;生长特性：悬浮聚集;形态特性：上皮细胞;相关产品有：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞

RT-4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代，每周２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：多角 ;相关产品有：CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞

He-La Cells;背景说明：HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系，它由GeyGO等在１９５１年从３１岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察，Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV１８序列，需在２级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性，p５３表达量较低，但表达正常水平的pRB（视网膜母细胞瘤抑制因子）。;传代方法：１：３传代，２-３天换液一次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞

Nthy-ori 3-1 Cells;背景说明：甲状腺；SV４０转化；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Hs 636 T细胞、LYR细胞、L 929细胞

SK-MEL-31 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞

SNK-1 Cells;背景说明：NK/T细胞淋巴瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CCD 966SK细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-2085细胞

SMMC7721 Cells;背景说明：用Northernblot方法，未能检测到细胞中１.３kbLFIRE-１/HFREP-１mRNA的表达。;传代方法：１：３传代，２-３天换液一次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞

CAL-33 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞

NCI-H1437 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：６传代,每周换液２次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞

A7r5 Cells大鼠胸大动脉平滑肌细胞|有STR图谱

SV40 MES 13 Cells小鼠肾小球系膜细胞|有STR图谱

NCI-H358 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱

A2780-GFP Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱

KU-19-19 Cells人膀胱癌细胞|有STR图谱

NCI-H446+luc Cells人小细胞肺癌细胞|有STR图谱

SW-10 Cells小鼠神经元细胞|有STR图谱

MOC1 Cells小鼠口腔鳞状细胞癌细胞|有STR图谱

L1210-Luc Cells小鼠淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱

SW480 Cells人结肠腺癌细胞|有STR图谱

T2-Luc Cells人淋巴母细胞|有STR图谱

A2780 Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱

DB Cells人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱

XC Cells大鼠Wistar肉瘤细胞|有STR图谱

SU.86.86 Cells人胰腺导管癌细胞|有STR图谱

OAW-28 Cells人卵巢上皮性肿瘤细胞|有STR图谱

LX-2-RFP Cells人肝星形细胞|有STR图谱

K562-GFP Cells人慢性髓系白血病细胞|有STR图谱

NCI-H727 Cells人肺癌细胞|有STR图谱

D407 Cells人视网膜色素上皮细胞|有STR图谱

HCe-8693 Cells人盲肠腺癌细胞|有STR图谱

SK-OV-3-RFP Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱

LX-2-RFP Cells人肝星形细胞|有STR图谱

ME-180 Cells人子宫颈表皮癌细胞|有STR图谱

CIK Cells草鱼肾脏细胞|有STR图谱

SW-10 Cells小鼠神经元细胞|有STR图谱

NCI-H1975 Cells人肺腺癌细胞|有STR图谱

GP293 Cells人胚肾细胞|有STR图谱

HAPI Cells大鼠小胶质细胞|有STR图谱

BT-483 Cells人乳腺导管癌细胞|有STR图谱

U-138MG Cells人脑星形胶质母细胞瘤细胞|有STR图谱

K7M2-WT-luc Cells小鼠骨肉瘤成骨细胞|有STR图谱

GL261-GFP Cells小鼠胶质瘤细胞|有STR图谱

Panc-1-Luc Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱

Jurkat-Luc Cells人急性T淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱

NCI-H358 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱

OAW42 Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱

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