"WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
WI 38 VA13 subline 2RA; WI 38 VA-13 subline 2RA; WI 38VA13 subline 2RA; WI-38 VA13 sub 2 RA; WI38-VA13 subline 2RA; WI38 VA13/2RA; WI38VA13/2RA; VA13 2RA; WI-38 VA13; WI 38 VA 13; WI38-VA13; WI38/VA13; WI38VA13; VA-13; VA13; AG07217; AG7217
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
细胞培养瓶破裂或渗漏是实验室最紧急的情况之一。当发现容器破损时,应立即执行三级处理流程:首先将破损培养瓶放入生物安全柜,用消毒剂浸泡的纱布覆盖裂口;随后将培养物转移至备用培养瓶,转移过程需严格保证无菌操作;最后对工作台面进行彻底消毒。值得注意的是,聚乙烯材质的培养瓶在反复冻融后更易产生微裂纹,建议使用前进行透光检查。对于珍贵细胞系,可预先分装冻存备份,并建立定期镜检制度,每周至少两次检查培养容器完整性。
【背景信息】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在生命科学研究的微观世界里,细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台,而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时,胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师,用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。
细胞根据其形态和功能可以分为多种类型,其中上皮细胞、成纤维细胞和淋巴母细胞是常见的三种类型。成纤维细胞,或称纤维母细胞,是一种存在于蜂窝组织或纤维结缔组织中的梭形细胞,能够分泌构成细胞外基质(ECM)的结构蛋白。这类细胞最初由德国病理学家鲁道夫·菲尔绍与法国解剖学家马蒂亚斯·杜瓦尔于19世纪中叶描述。成纤维细胞特异性标志物包括FAP(成纤维细胞激活蛋白)、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)、骨膜蛋白、PDGFRα(血小板衍生生长因子受体α)、胶原蛋白、波形蛋白、纤连蛋白和胸腺细胞抗原1等。成纤维细胞在形态上是扁平的纺锤形细胞,缺乏基底膜,细胞核呈圆形拉长,被巨大的内质网包围。在培养中,它们表现出不同的形态学和生化特征,这取决于其起源位置、分化状态和培养条件。
【物种来源】
WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化WI-38 VA13 subline 2RA Cells人胚肺细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
传代消化是细胞培养的关键步骤,但许多新手因担心胰酶损伤细胞而过早终止消化。实际上,适度延长消化时间(如等待细胞完全变圆)反而能减少机械吹打对细胞的伤害。过早终止消化会导致细胞未完全脱离,用力吹打产生的气泡和剪切力对细胞的损伤远大于胰酶本身。常规操作中,建议在显微镜下监控消化过程,待80%-90%细胞变圆后轻柔晃动培养瓶,使细胞自然脱落。此外,吹打时应避免产生气泡,因为气泡破裂时的机械应力会直接损伤细胞膜。
虽然1×10^6 cells/mL是通用推荐值,但特定细胞可能需要调整:原代细胞:如肝细胞或神经元,通常需要更高密度(2-5×10^6 cells/mL)以维持功能完整性;悬浮细胞:如淋巴细胞,对密度耐受性较强,但低于5×10^5 cells/mL仍会导致活性显著降低;干细胞:间充质干细胞(MSCs)在1.5×10^6 cells/mL时表现出最佳分化潜能保留。值得注意的是,密度过高(如>5×10^6 cells/mL)可能引起冻存液渗透压失衡,反而降低复苏效率。因此,优化需结合具体细胞特性。
OSC19 Cells;背景说明:舌鳞癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BL-6细胞、SEG-1细胞、SU86_86细胞
MODE-K Cells;背景说明:小肠;上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞
A-20 Cells;背景说明:淋巴瘤;BALB/cAnN;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
Hs742T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞
HTori:3 Cells;背景说明:甲状腺;SV40转化;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
GM16563 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 HDLBP (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
343MG Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
NCIH1781 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
H1734 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:H-250细胞、211H细胞、BE2C细胞
LLC-MK2 Cells;背景说明:胚胎;肾;自发永生;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
CMECs Cells;背景说明:心肌微血管;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞
OCI/AML2 Cells;背景说明:急性髓系白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5) Cells;背景说明:骨肉瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
G361-mel Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
HPC-Y1 Cells(提供STR鉴定图谱)
JHU047i Cells(提供STR鉴定图谱)
MCW037i-50000777 Cells(提供STR鉴定图谱)
ND24217 Cells(提供STR鉴定图谱)
PR00796 Cells(提供STR鉴定图谱)
UC1BC1 Cells(提供STR鉴定图谱)
ZIPi015-E Cells(提供STR鉴定图谱)
HG02287 Cells(提供STR鉴定图谱)
MCAEC Cells;背景说明:冠状动脉内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM15452细胞、293T细胞、McA-RH 7777细胞
NCIH596 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:8传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞
Mac-1 Cells;背景说明:皮肤T淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U87细胞、SNU761细胞、3396细胞
MDA-MB468 Cells;背景说明:该细胞是1977年由CailleauR等从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供体组织的G6PD等位基因杂合,但此细胞株始终表现为G6PDA表型。P53基因273位密码子存在G→A突变,从而导致Arg→His替代。每个细胞上存在1×106个EGF受体。;传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:MDA MB 453细胞、A375S2细胞、U-343MG细胞
X63.Ag8.653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
X63.Ag8.653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
COR L279 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
6T-CEM Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SNU-449细胞、MALME 3M细胞、Cattle chondrocytes细胞
Epithelioma Papulosum Cyprini Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
ECV-304 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
X63 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MPASMC细胞、C8-D1A细胞、SU4细胞
X63-AG 8.653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
Sp2/mIL-6 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
SNU251 Cells;背景说明:卵巢内膜癌;腹水转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
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