"NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
H2444; H-2444; NCIH244
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
不同细胞类型对传代次数的敏感性存在差异。原代细胞通常只能在体外维持5-8代,而永生化细胞系可传代50次以上仍保持稳定。但值得注意的是,即使是永生化细胞系,其20代前后的基因表达谱也存在约15%的差异。总之,在生物医学研究中坚持使用低代次细胞不仅是技术规范,更是科研诚信的体现。研究人员需要建立代次意识,将细胞传代记录纳入实验室标准操作流程,并通过定期质量检测确保细胞状态的稳定性。只有从源头把控实验材料的一致性,才能产出经得起检验的可靠数据,推动生物医学研究的良性发展。
【背景信息】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞传代是细胞培养中的一项基本操作技术,其目的是使细胞持续保持良好的生长状态,同时扩大细胞培养规模。细胞传代操作看似简单,但其中涉及诸多细节和注意事项,需要实验人员严格遵循操作规程,才能确保细胞培养的成功。
细胞培养应用于分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等领域,细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出,然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离,也可以来源于已建立的细胞系。传代培养是指当细胞生长至高密度时,将其分殖至新的培养瓶中,以维持其生长和增殖。贴壁细胞是指在培养基表面附着生长的细胞,悬浮细胞是指在培养基中悬浮生长的细胞,不依附于培养皿表面。半贴壁半悬浮细胞同时具备贴壁细胞和悬浮细胞的特点,通常在培养基中部分附着生长,部分悬浮于培养基上。
【物种来源】
NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化NCI-H2444 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
一般来说,在开始细胞消化时,可以先根据经验设定一个大致的消化时间,然后在这个时间点前后密切观察细胞的状态。如果消化时间过长,可能会导致细胞受损,影响细胞的活性和功能;而消化时间过短,则可能导致细胞没有完全分离,影响传代效果。还可以通过观察消化液的浑浊程度来判断。在消化开始时,消化液通常是比较澄清的。随着消化的进行,当细胞逐渐脱落进入消化液中,消化液会变得浑浊。当浑浊度达到一定程度,且细胞形态也符合消化完成的特征时,可以认为消化好了。总之,在细胞传代用胰酶消化时,需要综合考虑细胞形态变化、拍打或晃动的反应、消化时间以及消化液的浑浊程度等多个因素,来准确判断消化是否完成。
PaCa2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
KP-2 Cells;背景说明:胰腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
GTL-16 Cells;背景说明:胃癌;肝转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
G519 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
HeLa Cells;背景说明:HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它由GeyGO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。;传代方法:1:3传代,2-3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
HAP1 ANO5 (-) Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 SLC25A20 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
MDA-MB 453 Cells;背景说明:该细胞系由CailleauR在1976年从一名48岁的患有转移性乳腺癌的白人女性的心包渗出液中分离建立的。该细胞表达FGF的受体。;传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;多角形;相关产品有:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
BT325 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:QGY细胞、J82细胞、HuH7细胞
MES-SA Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:6-1:8传代;每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞样 ;相关产品有:MCF-12A细胞、SUNE 1细胞、6-10B细胞
NIH3T3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
HCC-1143 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
SW 527 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
769-P Cells;背景说明:该细胞系1975年建系,源自一位63岁白人女性的初期透明细胞腺癌组织,细胞呈圆形且边界不清,核浆比大,有微绒毛及桥粒。该细胞可在软琼脂上生长。 ;传代方法:1:4—1:12传代,2—3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞
WILL-2 Cells;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
I 9.2 Cells(提供STR鉴定图谱)
Leeporter Jurkat FOXP3 luciferase Cells(提供STR鉴定图谱)
NARO-Hycu Cells(提供STR鉴定图谱)
P991 Cells(提供STR鉴定图谱)
RXF 944L Cells(提供STR鉴定图谱)
UAZTi011-A Cells(提供STR鉴定图谱)
UML-49 Cells(提供STR鉴定图谱)
HBEC38-KT Cells(提供STR鉴定图谱)
WM451Lu Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞
D324 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:多边形;相关产品有:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
Rat Lung-65 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:M-07e细胞、OCI Ly3细胞、Mv.1.Lu细胞
Eca-109 Cells;背景说明:1973年建系,来自人食管中段鳞癌组织,小块法原代培养建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞
PLA801D Cells;背景说明:这是一株高转移肺癌。;传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
PF382 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞
NCI-H3255 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞
RPMC Cells;背景说明:腹膜间皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RA-FLSs细胞、NeHepLxHT细胞、H2286细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14 Cells;背景说明:肾癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
GM07404D Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
PE CA PJ34 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
PFSK1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
LTEP-a-2 Cells;背景说明:肺腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BOWES细胞、SKNBE(2c)细胞、A498细胞
RBMVEC Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞
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