"T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
T-47-D; T47-D; T47D:A; T47D
传代培养是细胞培养技术中的关键环节,其核心目的是维持细胞的健康增殖并获取稳定的实验材料。当细胞在培养瓶中生长至80%-90%汇合度时,细胞间的接触抑制和营养竞争会导致生长速率下降,此时必须通过传代操作将细胞分散并重新接种。这一过程不仅解决了培养空间限制问题,还能通过细胞扩增建立可持续研究的细胞株系。然而值得注意的是,反复传代可能导致细胞表型改变,例如间充质干细胞多次传代后可能出现分化能力下降,因此需严格控制传代次数和操作规范。
公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库,细胞系体外培养,它们会成长为单层细胞,附着或紧贴在培养瓶上,或悬浮在体外的溶液中,细胞系复苏周期短,公司细胞系状态良好,饱满,有光泽等优点。EDTA的作用:许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话),而应该想其它办法。
【背景信息】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱最初是从一位54岁女性的乳房侵入性导管癌患者的胸腔积液中分离出来的;发现分化的上皮亚株(T-47D)有细胞质连接和17-β-雌二醇及其他类固醇降血钙素的受体,T-47D细胞表达WNT7B癌基因。
【传代比例】
1:2-1:4(T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在生命科学研究的微观世界里,细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台,而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时,胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师,用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化T-47D Cells人乳腺管癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
细胞冻存过程中,密度过低会导致细胞在复苏时因缺乏足够的细胞间接触和旁分泌信号而存活率下降。当冻存密度低于1×10^6 cells/mL时,细胞在解冻后可能面临以下问题:营养竞争不足:低密度下细胞分泌的促存活因子(如生长因子)浓度不足,无法有效支持细胞贴壁和增殖;物理损伤加剧:冻存时形成的冰晶会破坏细胞膜结构,而高密度细胞群可通过相互缓冲减轻机械损伤;氧化应激增加:单个细胞暴露在冻存液中的表面积更大,更容易受到自由基攻击。
OUMS-23 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
Renal Carcinoma Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞
Emory University-3 Cells;背景说明:B淋巴细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI747细胞、CHP100细胞、Capan-2细胞
Emory University-3 Cells;背景说明:B淋巴细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI747细胞、CHP100细胞、Capan-2细胞
GM03569 Cells;背景说明:该细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。该细胞不分泌免疫球蛋白,对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤有抗性,对HAT比较敏感;该细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤;鼠痘病毒阴性。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;圆形;相关产品有:UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
GM25411 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 NR1H3 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
H1436 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:随细胞的密度而增加;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
SV-HUC-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞
HepaRG Cells;背景说明:肝癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
U118-MG Cells;背景说明:注意: 据报道来自不同个体的胶质母细胞瘤细胞株U-118 MG (HTB-15) 和 U-138 MG (HTB-16)有着一致的VNTR和相近的STR模式。 U-118 MG 和 U-138 MG细胞遗传学上很相似并有至少六个衍生标记染色体。 这是1966年至1969年间J. Ponten和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括ATCC HTB-14和 ATCC HTB-16 and ATCC HTB-17)。 1987年用BM-Cycline培养6周去除了支原体污染。 ;传代方法: 消化3-5分钟。1:2传代。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:混合型;相关产品有:SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
RT-BM 1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成神经细胞;相关产品有:B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞
EB-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
ETCC-007 Cells;背景说明:原位导管癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
SJRH 30 Cells;背景说明:肺泡横纹肌肉瘤;骨髓转移;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
Hs 273.T Cells(提供STR鉴定图谱)
KM20L2 Cells(提供STR鉴定图谱)
ML-DmD8 Cells(提供STR鉴定图谱)
NS0-Turbodoma Cells(提供STR鉴定图谱)
RECC-UG6 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene HCT 116 SOCS4 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
WAe009-A-67 Cells(提供STR鉴定图谱)
HG01857 Cells(提供STR鉴定图谱)
P388D1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞
Human Fetal Thymocyte-8810 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
SUM 159 Cells;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞
CZ-1 Cells;背景说明:骨髓瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞
CZ-1 Cells;背景说明:骨髓瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞
NUGC4 Cells;背景说明:胃癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:半贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCEpiC细胞、IGROV-1细胞、TGW-nu-1细胞
BT474 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
TCC-PAN2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞
C17.2 Cells;背景说明:神经干细胞;C57BL/6 x CD-1;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞
D324 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:多边形;相关产品有:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
D-283MED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁 Cells;形态特性:上皮细胞;相关产品有:293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞
MRAEC Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LNCaP C4-2B细胞、LS-123细胞、RAMSCs细胞
NCIH661 Cells;背景说明:该细胞1982年建系,源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。;传代方法:1:3—1:5传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞
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