嚏根草配基，465-90-7，自制标准品，对照品，HPLC≥98%以上

蟾蜍它里定通过抑制 Akt 诱导人肝细胞癌 HepG2 细胞的细胞周期停滞和凋亡。

蟾蜍它里定 是属于心脏活性类固醇的 bufadienolides 之一，存在于蟾蜍以及 Helleborus 和 Kalanchoe 属植物的皮肤分泌物中。
方法和结果：
在寻找具有抗肝癌活性的天然成分时，我们发现从中药 Venenum Bufonis 中分离的 Hellebrigenin 有效降低了人肝细胞癌细胞 HepG2 的活力和集落形成，并继续探索潜在的分子机制。我们的结果表明，Hellebrigenin 通过 DNA 双链断裂触发 DNA 损伤，随后诱导细胞周期 G2/M 停滞与 p-ATM （Ser（1981））、p-Chk2 （Tyr（68））、p-CDK1 （Tyr（15）） 和细胞周期蛋白 B1 以及 p-CDC25C （Ser（216）） 下调相关。研究还发现 Hellebrigenin 诱导线粒体凋亡，其特征是 Bax 易位到线粒体、线粒体膜电位破坏、细胞色素 c 释放到胞质溶胶中以及 caspase 和 PARP 的连续激活。此外，Hellebrigenin 抑制了 Akt 表达和磷酸化，而 Akt 沉默 siRNA 显著阻断了细胞周期停滞，但增强了 Hellebrigenin 诱导的细胞凋亡。人胰岛素样生长因子 I （hIGF-I） 激活 Akt 可明显减轻 Hellebrigenin 诱导的细胞死亡。
结论：
综上所述，本研究首次报道了 Hellebrigenin 对 HepG2 的疗效，并阐明了其分子机制，包括 DNA 损伤、线粒体崩溃、细胞周期停滞和细胞凋亡，这将有助于 Hellebrigenin 发展成为治疗肝癌的化疗药物。