脯氨酸含量检测试剂盒（分光光度50T/48S）

脯氨酸（Pro）含量测定试剂盒说明书

分光光度法 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

Pro 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内 Pro 含量显著增加。Pro 增 加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为 抗逆育种的生理指标之一。

测定原理：

用磺基水杨酸（SA）提取 Pro，加热处理后，Pro 与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃取后， 在 520nm 测定吸光度。

自备仪器和用品： 

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 ml 玻璃比色皿、冰乙酸 50ml、甲苯 50ml、 研钵、冰和蒸馏水。

样品测定的准备：

1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4个）：提取 液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液），超声波破碎细菌或细胞 （冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；之后置 95℃水浴振荡提取 10min；10000g， 25℃离心 10min，取上清，冷却后待测。 

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液）， 进行匀浆；之后置 95℃水浴振荡提取 10min；10000g，25℃离心 10min，取上清，冷却后待测。

2、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（ml）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议取 0.1ml 血清 （浆）加入 1ml 提取液），充分混匀，之后置 95℃水浴振荡提取 10 分钟，10000g，25℃离心 10 分钟，取 上清，冷却后待测。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。

2、样本测定：

(1)取 0.5ml 样本+0.5ml 试剂一+0.5ml 试剂二 于有盖试管中，置 95℃水浴中保温 30min（盖紧，防止水分 散失），每 10min 振荡一次。

(2)待冷却后，在试管中加入 1ml 试剂三，振荡 30s，静置片刻，使色素转至试剂三中；吸取 0.8ml-1ml 上 层溶液于 1ml 玻璃比色皿中，于 520nm 波长处比色，记录吸光值 A。

温馨提示：本产品不可用于临床，折扣详询客服。