过氧化物酶（POD）检测试剂盒（微量法100T/96S）

过氧化物酶(Peroxidase，POD)试剂盒说明书 

微量法 100 管/96 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类 化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

测定原理：

POD 催化 H2O2 氧化特定底物，在 470nm 有特征光吸收。

自备仪器和用品： 

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水 。

粗酶液提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4个）： 提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液），超声波破碎细菌或 细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰 上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提 取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 

2、血清（浆）样品：直接检测。 

测定步骤： 

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 470nm，蒸馏水调零。

2、工作液的配制：临用前将试剂一、试剂二、试剂三按照 2.6（ml）：1.5（μl）：1（μl）的比例混匀； 在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）预热 10min 以上；现配现用。

3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μl 样本和 190μl 工作液，混匀，记录 470nm 下 1min 时吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2。计算ΔA＝A2-A1。 

注意：

如果ΔA 小于 0.005，可将反应时间延长到 5min。如果ΔA 大于 0.5，可将样本用提取液稀释后测定， 计算公式中乘以相应稀释倍数。

温馨提示：本产品不可用于临床，详询客服。