胃蛋白酶检测试剂盒（微量法 100T/48S）

胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒说明书

微量法 100T/48S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃 炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。

测定原理： 

胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃 蛋白酶活性呈正比。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰 和蒸馏水。

粗酶液提取：

组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试 剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即粗酶液。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 580nm，蒸馏水调零。

2. 试剂三和试剂四置于 37℃水浴预热 30min。

3. 标准管：取微量玻璃比色皿/96 孔板，加入 20μl 标准品，40μl 试剂二，120μl 试剂五，20μl 试剂六，混 匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 标准管。

4. 空白管：取微量玻璃比色皿/96 孔板，加入 20μl 蒸馏水，40μl 试剂二，120μl 试剂五，20μl 试剂六，混 匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 标准空白管。 

5. 对照管：取 EP 管，加入 100 μl 蒸馏水，置于 37℃水浴保温 10min；加入 100μl 试剂四，盖紧后摇匀 1min；加入 20μl 粗酶液，混匀后 8000g 4℃离心 10 分钟取上清；在微量玻璃比色皿/96 孔板加入上清液 20μl， 再加入 40μl 试剂二，120μl 试剂五，20μl 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 空白管。

6. 测定管：取 EP 管，加入 20μl 粗酶液，100μl 试剂三，置于 37℃水浴保温 10min；加入 100μl 试剂四， 盖紧后摇匀 1min；8000g 4℃离心 10 分钟取上清；在微量玻璃比色皿/96 孔板加入上清液 20μl，再加入 40μl 试剂二，120μl 试剂五，20μl 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 测定管。

注意：空白管和标准管只需要测定一次。