可溶性果胶（WSP）检测试剂盒（微量法 100T/48S）

可溶性果胶(WSP)含量试剂盒说明书

微量法 100 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义： 

果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。果胶中含有 半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是许多高等植物细胞壁中含量最丰富的多糖成分，其独特 的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以 Ca 2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键 和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶，如水溶性果胶（WSP）、离子结 合型果胶（ISP）和共价结合果胶（CSP）。

测定原理： 

利用酸溶液提取得到（WSP）可溶性果胶，采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸， 在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在 530 nm 处有最大吸收峰。

需自备仪器和用品： 

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英玻璃比色皿/96 孔板、80％乙醇、丙酮、 浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。 

样品的前处理： 

1、细胞壁的提取：取约 0.3g 样本，加入 1ml 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20min，冷却至室 温，4000g 25℃离心 10min，弃上清。沉淀加入 1.5ml80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡 2min 左右，4000g 25℃离心 10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1ml 试剂一（去除淀粉）浸泡 15 小时，4000g 25℃离心 10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。

2、WSP 的提取：称取烘干的 CWM 3mg，加入 1ml 试剂二，充分匀浆(若烘干物质质地坚硬，可先研 碎后再加入 1ml 试剂二匀浆，或者用匀浆器匀浆)。8000g 4℃离心 10min，取上清液待测。