氧化型谷胱甘肽检测试剂盒（GSSG）（分光光度法50T/48S）

氧化型谷胱甘肽含量测定试剂盒说明书 

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义： 

GSH/GSSG 是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此，测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态，也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。

测定原理：

利用 2-VP 法测 GSSG 含量。

自备仪器和用品： 

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml 玻璃比色皿和蒸馏水。 

粗酶液提取： 

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂 一）进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清液（如上清不清澈，再离心 3min）待测。 

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10 4个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加 入 1ml 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；8000g 4℃离 心 10min，取上清液（如上清不清澈，再离心 3min）的蒸馏水混匀待测。 3. 血清等液体：直接测定。

测定操作: 

1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 412 nm，蒸馏水调零。 

2. 试剂六置于 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴中保温 30min。 3. 测定管：取 1 ml EP 管，加入 100 μ L 上清液，5μ L 试剂二，盖紧后混匀，置于 37℃水浴 30min；依次 加入 100 μ L 试剂四，10 μ L 试剂五，700 μ L 试剂六，迅速混匀后，立即测定 30 s 和 150 s 光吸收 A1 和 A2，计算ΔA=A2-A1。