3X FLAG PEPTIDE多肽抗体定制蛋白纯化表达制备高效

3X Flag多肽是一种带有FLAG标签的多肽，以下是对其的详细描述：

一、基本结构

• ‌序列特点‌：3X Flag多肽包含三个重复的Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp基序，其中Xaa通常为特定氨基酸（如Gly或Ser），以增加序列的灵活性和溶解度。这一多肽序列也可以表示为DYKDDDDK的重复，其中DYKDDDDK是FLAG标签的编码序列，由8个氨基酸组成。因此，3X Flag多肽是一种含有23个氨基酸的合成多肽，由三个DYKDDDDK序列组成。

• ‌经典序列‌：在C端，有一个由8个氨基酸组成的经典FLAG序列Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，这是与Anti-FLAG抗体结合的关键部位。

二、功能与应用

• ‌蛋白分离纯化‌：3X Flag多肽与目标蛋白融合表达后，可以利用商业上可获得的、高度特异性的FLAG抗体或与之结合的亲和树脂（如FLAG M2树脂）来捕获这些融合蛋白。这种方法基于抗原-抗体相互作用或特定分子间的亲和力，能够高效且特异性地从复杂混合物（如细胞裂解液、组织提取物或发酵液中）中分离出目标蛋白。

• ‌目标蛋白竞争性洗脱‌：在纯化过程中，一旦目标蛋白被FLAG亲和树脂捕获，可以通过竞争性洗脱的方式将其从树脂上释放。这通常涉及使用高浓度的FLAG肽段（如游离的3X Flag多肽）作为竞争性配体，它们与树脂上的FLAG抗体或结合位点结合，从而替代并释放出原本结合的目标蛋白。这种方法既保持了目标蛋白的活性，又允许了纯化过程的灵活性和可控性。

• ‌检测与定位‌：3X Flag多肽具有良好的抗原性和反应性，能够与特定的抗FLAG抗体结合，从而实现对目标蛋白的定位、检测以及纯化。由于包含多个FLAG标签序列，3X Flag多肽可显著提高检测灵敏度，能够检测低至10fmol的融合蛋白，这对于低表达水平的蛋白质检测尤为重要。

三、其他特性

• ‌强抗原性‌：由于FLAG标签序列的特定排列，3X Flag多肽具有很强的抗原性，便于通过Western Blot、ELISA等方法进行检测和鉴定。

• ‌可去除性‌：Flag标签可以用肠激酶法处理去除，肠激酶能够特异性地作用于C端的5个氨基酸多肽序列，从而得到特异的目的蛋白。

四、储存与注意事项

• ‌储存条件‌：3X Flag多肽应在干燥、低温条件下储存，以保持其活性和稳定性。通常建议储存在-20℃或更低温度下。

• ‌安全性‌：在正常实验操作下，3X Flag多肽的安全性较高。但应遵守相关实验室规范和安全操作指南，避免接触到眼睛、皮肤和吸入，以防过敏或其他可能的不良反应。

综上所述，3X Flag多肽作为一种强大的生物标记工具，在蛋白质科学研究中发挥着不可替代的作用，极大地促进了蛋白质分离纯化技术的发展。