KURAMOCHI 人卵巢癌细胞

KURAMOCHI 人卵巢癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性，未知

组织来源:腹水

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞背景：

名称：KURAMOCHI（日本国立癌症中心建立）

类型：人卵巢透明细胞癌（CCC）

分子特征：

源自62岁日本女性患者的原发卵巢肿瘤

ARID1A缺失型（表观遗传调控异常）

独特突变：PIK3CA E545K，PPP2R1A突变

分子亚型：HNF-1β+（典型透明细胞癌标志）

2. 关键生物学特征：

参数  描述

形态  贴壁生长，多边形伴透明胞质

标志物  HNF-1β+++, Napsin A+, WT1-

基因特征  ARID1A缺失，PIK3CA激活突变

药敏特征  对顺铂耐药（IC50 >20μM）

代谢特性  糖酵解依赖（乳酸分泌量>5mM/24h）

3. 培养体系优化：

培养基配方：

DMEM/F12 + 15% FBS +

关键添加物：

10mM HEPES（缓冲酸性代谢物）

2mM L-谷氨酰胺

1mM丙酮酸钠

10ng/mL EGF

传代规范：

胰酶-EDTA（0.25%）消化8分钟

1:3比例接种于胶原IV包被培养皿

传代周期：4-5天（倍增时间48±6h）

3D培养方案：

基质胶嵌入式培养（模拟卵巢囊腺结构）

缺氧培养（1% O?）增强恶性表型

4. 研究应用：

耐药机制：

ARID1A缺失与DNA修复缺陷关联

糖酵解抑制剂（2-DG）敏感性测试

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。