IM95m胃癌细胞

IM95m胃癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，63岁

组织来源:胃

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM+ 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系基础特征：

组织来源

源自人 胃腺癌（具体亚型需验证，可能为低分化或印戒细胞癌），与 EBV感染无关（需通过EBER原位杂交排除EBV相关性胃癌）。

临床关联：适用于研究胃癌的侵袭转移机制及化疗耐药性。

分子特征

高频突变：

TP53突变（如R175H或R248W）、CDH1（E-cadherin）缺失（常见于弥漫型胃癌）。

KRAS/EGFR状态：需验证是否存在KRAS G12D/V或EGFR扩增（影响靶向治疗策略）。

标志物表达：

阳性：CK18、MUC1（上皮标志），PD-L1 CPS评分需检测（免疫治疗潜力）。

阴性：HER2（IHC 0/1+或FISH阴性），MSI-H相关蛋白（MLH1/PMS2正常）。

培养特性

生长方式：贴壁生长，细胞呈梭形或多角形，接触抑制弱，易形成重叠克隆。

增殖速度：较快（倍增时间约24-36小时），需每2-3天传代。

2. 核心科研应用：

靶向治疗研究

抗血管生成治疗：测试雷莫芦单抗（抗VEGFR2）联合紫杉醇的协同效应。

Claudin 18.2靶向：若CLDN18.2阳性（IHC≥2+），可评估抗体偶联药物（如Zolbetuximab）的疗效。

化疗耐药模型

对5-FU/奥沙利铂的敏感性中等，可通过长期低剂量诱导构建 顺铂耐药亚克隆（需检测ATP7A/B过表达）。

研究 肿瘤微环境（TME）介导耐药：与癌症相关成纤维细胞（CAFs）共培养，分析IL-6/JAK/STAT通路激活。

转移机制

体内模型：脾脏注射模拟肝转移（4-6周成瘤），或腹膜注射模拟扩散性转移。

EMT标记分析：检测Snail、Twist及N-cadherin表达上调。

3. 标准化操作指南：

培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% GlutaMAX + 10 ng/mL EGF（维持恶性表型）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），终止时加入含血清培养基。

接种密度：1×10? cells/cm2（低密度避免自发分化）。

质量控制

分子验证：

季度检测TP53/CDH1突变（NGS或Sanger测序）及STR分型（比对原文献或细胞库）。

功能验证：

Transwell侵袭实验（Matrigel预铺，评估MMP-2/9活性）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。