Hs 888.T人骨肉瘤细胞

Hs 888.T人骨肉瘤细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:20 岁，白人男性

组织来源:骨

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10%fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞背景：

名称：Hs 888.T（ATCC? CRL-7423?）

类型：人骨肉瘤（成骨性）

分子特征：

源自17岁男性患者的原发胫骨肿瘤

TP53 R248W突变，RB1缺失

高表达RUNX2（成骨分化关键转录因子）

具有显著的自分泌WNT信号激活

2. 关键生物学特征：

参数  描述

形态  贴壁生长，多角形/梭形混合

标志物  ALK+, SATB2+, CD99-

基因特征  MDM2扩增（7.1拷贝数），MSC突变

药敏特征  对多柔比星敏感（IC50 0.1μM）

成骨特性  自发钙化（茜素红染色阳性）

3. 培养体系：

培养基配方：

α-MEM + 15% FBS + 1% NEAA

关键添加物：

10mM β-甘油磷酸钠（促进矿化）

50μg/mL抗坏血酸（胶原合成）

10nM地塞米松（诱导分化）

传代规范：

0.25%胰酶+0.1%胶原酶IV消化8分钟

1:2比例接种于明胶包被培养皿

传代周期：5-7天（倍增时间48±6h）

冻存方案：

冻存液：90% FBS + 10% DMSO + 5%葡萄糖

程序：程控降温（-1℃/min）

必需检测：冻存前后成骨潜能验证

4. 研究应用：

分子机制：

骨肉瘤干细胞维持（CD117+分选）

WNT/β-catenin信号异常激活

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。