Hs 870.T人骨肉瘤细胞

Hs 870.T人骨肉瘤细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:日本男性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10%fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人骨肉瘤（Osteosarcoma）组织，属高度恶性间叶组织肿瘤，可能来源于成骨细胞谱系。

分子标签：

高频突变：TP53突变（＞70%骨肉瘤特征）、RB1缺失（细胞周期调控异常），需验证MYC或MET扩增状态（与转移相关）。

标志物表达：SATB2+（成骨分化标志）、ALK±（靶向治疗潜力），PD-L1表达需检测（免疫治疗可能性）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈梭形或多角形，可形成矿化结节（需茜素红染色验证）。

增殖速度快（倍增时间约22-28小时），接触抑制弱，易形成重叠生长。

临床相关性

骨肉瘤研究的经典模型，适用于 肺转移机制 及 新辅助化疗耐药性 研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试mTOR抑制剂（如依维莫司）联合化疗（甲氨蝶呤）的协同效应。

评估抗ALK抑制剂（如克唑替尼）的敏感性（若ALK阳性）。

转移机制：

胫骨原位注射裸鼠模型模拟肺转移（需显微CT监测骨破坏）。

单细胞测序解析循环肿瘤细胞（CTCs）的克隆演化。

微环境模拟

3D培养：与成骨细胞共培养模拟"肿瘤-骨界面"（检测TRAP阳性破骨细胞活性）。

类器官模型：患者来源类器官（PDO）用于个体化药物筛选。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：α-MEM（含抗坏血酸50 μg/mL） + 15% FBS + 1% NEAA（支持成骨分化）。

传代要点：

消化时间：3分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩立即终止。

接种密度：5×103 cells/cm2（低密度维持未分化状态）。

冻存：程序降温冻存液（80% FBS + 10% DMSO + 10%培养基），液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测TP53/RB1状态（免疫组化/NGS）及STR分型（比对ATCC或DSMZ数据库）。

功能检测：

体外矿化实验（β-甘油磷酸钠诱导，茜素红染色验证）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。