Hs 688(A.T人黑素瘤细胞

Hs 688(A.T人黑素瘤细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:未知

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10%fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人皮肤恶性黑色素瘤（原发/转移灶需验证），属高侵袭性亚型。

分子标签：

高频突变：BRAF V600E（约50%黑素瘤特征）、NRAS Q61K/R（与BRAF野生型互斥），CDKN2A缺失（细胞周期失调）。

标志物表达：S100+、HMB-45+（黑素瘤标志），PD-L1表达可变（免疫治疗潜力）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈梭形或星形，伪足明显，接触抑制完全丧失。

增殖速度快（倍增时间约20-28小时），需频繁传代（2-3天）。

临床相关性

适用于 靶向BRAF/MEK抑制剂（如达拉非尼+曲美替尼）及 免疫检查点阻断疗法（如PD-1抗体）的耐药机制研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试BRAF抑制剂耐药机制（如NRAS突变或COX-2过表达）。

研究MITF（小眼畸形转录因子）调控的代谢重编程（如OXPHOS与糖酵解平衡）。

免疫治疗：

评估CTLA-4抗体联合LAG-3抗体的协同效应（需构建人源化小鼠模型）。

类器官共培养模拟T细胞浸润动态（需荧光标记CD8+ T细胞）。

转移模型

尾静脉注射：4周形成肺/脑转移灶（活体成像监测荧光标记细胞）。

单细胞测序：解析肿瘤干细胞（如ABCG2+亚群）的转录异质性。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 ng/mL bFGF（维持侵袭性）。

传代要点：

消化时间：3分钟（0.05%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩立即终止。

接种密度：8×103 cells/cm2（低密度避免分化）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测BRAF/NRAS突变（ddPCR）及STR分型（比对ATCC/DSMZ数据库）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel，评估MMP-2活性）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。