HROBMC01人结肠癌细胞

HROBMC01人结肠癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:60 岁，白人女性

组织来源:结肠

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM + Ham'sF12+10%fetal bovine serum+2 mM L-glutamine

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人结肠腺癌组织（需验证原发/转移灶），病理亚型需确认（如微卫星稳定型MSS或高度微卫星不稳定型MSI-H）。

分子标签：

高频突变：APC（＞80%结肠癌特征）、KRAS（如G12D/V）、TP53突变，需验证BRAF V600E状态（与靶向治疗相关）。

标志物表达：CEA+、CK20+（肠上皮分化标志），PD-L1表达需检测（免疫治疗潜力）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈多边形或柱状，可形成腺样结构，接触抑制弱。

增殖速度中等（倍增时间约30-40小时），需定期消化避免过度融合。

临床相关性

适用于 肠癌靶向治疗（如抗EGFR疗法）及 免疫微环境（如CMS分型相关）研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试西妥昔单抗（EGFR抗体）的敏感性（依赖KRAS/BRAF野生型）。

研究MEK抑制剂（如司美替尼）在KRAS突变型中的合成致死策略。

免疫治疗：

评估PD-1抗体疗效（MSI-H型更敏感），需检测MMR蛋白（MLH1/MSH2）表达。

类器官共培养模拟肿瘤-免疫细胞互作（如Treg介导的免疫抑制）。

转移机制

脾脏注射模型：模拟肝转移（4-6周成瘤，需活体成像验证）。

单细胞测序：解析循环肿瘤细胞（CTC）的转录异质性。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% GlutaMAX + 10 mM HEPES（pH稳定性）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），轻柔吹打避免DNA释放。

接种密度：1.2×10? cells/cm2（低密度维持恶性表型）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮长期保存。

质控节点

分子验证：

季度检测KRAS/APC突变（Sanger测序）及STR分型（比对原文献或细胞库数据）。

功能检测：

软琼脂克隆形成实验（评估致瘤性）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。