HPAFII：HPAFII

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:白人男性，44 岁

组织来源:腹膜腹水

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:EMEM+ 10% heat inactivated fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征

组织来源：源自人胰腺导管腺癌（PDAC）转移灶（多来自肝转移），保留原发肿瘤的分子特征。

分子标签：

高频突变：KRAS G12D（＞90% PDAC特征）、TP53突变（R175H常见）、CDKN2A缺失（p16失活）。

标志物表达：CA19-9+（糖抗原）、MUC1+（黏液蛋白），PD-L1表达需验证（免疫治疗潜力）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈立方状或柱状，可形成腺样结构，接触抑制弱。

增殖速度中等（倍增时间约36-48小时），需低氧条件（5% O?）模拟肿瘤微环境。

临床相关性

转移性PDAC研究的经典模型，适用于 KRAS靶向策略 及 肿瘤微环境（如纤维化） 研究。

2. 核心科研应用

转化医学研究

靶向治疗：

测试KRAS G12D抑制剂（如MRTX1133）联合MEK抑制剂（曲美替尼）的协同效应。

研究Hedgehog通路抑制剂（如vismodegib）对肿瘤基质的调控作用。

转移机制：

脾脏注射裸鼠模型模拟肝转移（需活体成像监测）。

单细胞测序解析循环肿瘤细胞（CTC）的异质性。

微环境模拟

3D培养：与胰腺星状细胞（PSCs）共培养构建纤维化模型（胶原收缩实验验证）。

类器官：患者来源类器官（PDO）对比研究药物敏感性差异。

3. 标准化操作体系

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 ng/mL EGF + 5% O?（模拟低氧）。

传代要点：

消化时间：5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞间隙扩大终止。

接种密度：1×10? cells/cm2（高密度诱导分化）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测KRAS G12D突变（ARMS-PCR）及STR分型（比对ATCC CRL-2117）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel，评估MMP2/9活性）。

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