HLE人肝癌细胞

HLE人肝癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:64 岁，男性

组织来源:肝

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10%fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征：

组织来源：源自人肝细胞癌（HCC），属低分化型肝癌细胞系，具有高度侵袭性特征。

分子标签：

高频突变：TP53突变（＞80%）、β-catenin激活突变（CTNNB1 S45F常见），TERT启动子突变（端粒酶活性维持）。

标志物表达：AFP-（区别于HepG2）、GPC3+（肝癌诊断标志）、CK8/18+（上皮来源验证）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈梭形或多边形，边缘伪足明显，接触抑制丧失。

增殖速度快（倍增时间约22-28小时），需频繁传代（2-3天）。

临床相关性

适用于 高侵袭性肝癌机制 及 靶向β-catenin信号通路 的研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

转移机制：

研究Wnt/β-catenin通路与EMT的关联（通过Snail/ZEB1表达调控分析）。

尾静脉注射裸鼠模型模拟肺转移（4-6周成瘤，需活体成像监测）。

药物开发：

测试索拉非尼（多激酶抑制剂）与β-catenin抑制剂（如PRI-724）的协同效应。

评估PD-1抗体疗效（需先验证PD-L1表达水平）。

分子工具

基因编辑：通过CRISPR敲除CTNNB1基因，研究其对侵袭力的影响。

类器官模型：与肝星状细胞共培养模拟纤维化微环境。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 ng/mL EGF（维持增殖活力）。

传代要点：

消化时间：3分钟（0.05%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩立即终止。

接种密度：1×10? cells/cm2（低密度维持恶性表型）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测β-catenin突变（Sanger测序）及STR分型（比对JCRB数据库）。

功能检测：

Transwell侵袭实验（Matrigel预铺，24小时评估）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。