HHC6548 T1 M1人结肠癌细胞

HHC6548 T1 M1人结肠癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:未知

组织来源:结肠

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM + Ham's F12+10%fetal bovine serum+2 mM L-glutamine

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞背景：

名称：HHC6548-T1-M1（患者来源异种移植PDX衍生细胞系）

类型：人结直肠腺癌（转移性）

分子特征：

源自62岁男性结肠癌肝转移灶PDX模型第1代（T1）第1次传代（M1）

微卫星稳定型（MSS），KRAS G12D突变

高转移潜能（肝>肺>腹膜）

对奥沙利铂耐药（IC50 >20μM）

2. 关键生物学特征：

参数  描述

形态  贴壁生长，异型性明显

标志物  CK20++, CDX2+, Vimentin+

基因特征  KRAS G12D, APC truncating, TGFBR2突变

转移特性  自发肝转移（脾脏注射模型4周阳性率80%）

药敏特征  对瑞戈非尼敏感（IC50 1.2μM）

3. 培养体系：

培养基配方：

DMEM高糖 + 15% FBS + 1% NEAA

关键添加物：

10ng/mL HGF（增强转移潜能）

5μg/mL胰岛素（激活KRAS通路）

1mM丙酮酸钠

传代规范：

0.25%胰酶+0.1%胶原酶IV消化6分钟

1:2比例接种于Matrigel预包被培养皿

传代周期：3天（倍增时间28±2h）

冻存方案：

冻存液：90%条件培养基 + 10% DMSO

程序：程控降温（-1℃/min）

必需检测：冻存前后KRAS突变验证（ddPCR）

4. 研究应用：

转移机制：

EMT-MET动态转化研究

循环肿瘤细胞（CTC）捕获分析

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。