HARA人非小细胞肺癌细胞

HARA人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:57 苏，男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI-1640 Medium + 10%Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基础档案：

溯源与分子特征

组织来源：源自人非小细胞肺癌组织，病理亚型需验证（文献多提示为 肺腺癌），具有上皮-间质转化（EMT）特征。

分子标签：

驱动基因：需验证EGFR/ALK/ROS1/KRAS突变状态（常见于NSCLC），可能伴TP53共突变。

标志物表达：TTF-1+（腺癌标志）、Napsin A+，PD-L1表达需检测（与免疫治疗相关）。

培养特性：

贴壁生长，细胞呈多边形或梭形，接触抑制弱，易形成多层克隆。

增殖速度中等（倍增时间约30-36小时）。

临床相关性

适用于靶向治疗耐药机制研究（如EGFR-TKI获得性耐药）及免疫治疗疗效预测模型。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试第三代EGFR-TKI（如奥希替尼）对T790M/C797S突变的效果。

研究MET扩增或HER2突变介通的旁路激活耐药。

免疫微环境：

评估PD-1抗体联合CTLA-4抗体的协同效应（需检测CD8+ T细胞浸润）。

类器官共培养（与成纤维细胞/免疫细胞）模拟肿瘤生态位。

转移机制

尾静脉注射模型：4-6周形成肺/肝转移灶，研究CXCR4/CXCL12轴作用。

单细胞测序：解析EMT进程中的转录异质性。

3. 标准化操作体系：

培养方案

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 mM HEPES（pH缓冲）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞回缩后终止。

接种密度：2×10? cells/cm2（避免低密度停滞）。

冻存：程序降温冻存液（FBS:DMSO=9:1），复苏存活率>90%。

质控节点

分子验证：

季度检测EGFR/ALK状态（ARMS-PCR/NGS）及STR分型（比对JCRB数据库）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。