EoL1人白血病细胞

EoL1人白血病细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，68岁

组织来源:外周血

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI1640 + 10%+Foetal Bovine Serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

来源与病理特征：

组织来源：源自人 嗜酸性粒细胞白血病（EoL-1是研究 高嗜酸性粒细胞综合征（HES） 和 慢性嗜酸性粒细胞白血病（CEL） 的经典模型。

分子特征：

标志性突变：FIP1L1-PDGFRA融合基因（约50%病例阳性，需RT-PCR验证），导致组成性PDGFRα激酶激活。

免疫表型：CD45+、CD15+、CD11b+（髓系标志），嗜酸性颗粒染色阳性（如Luxol Fast Blue）。

培养特性：

悬浮生长，细胞体积较大，胞质内含明显嗜酸性颗粒。

增殖依赖IL-5/GM-CSF（需培养基中添加10 ng/mL IL-3或IL-5）。

临床相关性

对 伊马替尼（靶向PDGFRα的TKI）敏感，但可能因T674I突变耐药。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗机制：

研究FIP1L1-PDGFRA信号通路抑制剂（如伊马替尼、米哚妥林）的敏感性及耐药机制。

测试新型TKI（如阿伐替尼）对T674I突变型的抑制效果。

分化诱导：

丁酸钠或地塞米松处理可诱导嗜酸性粒细胞终末分化（形态学变化：核分叶增多）。

疾病模型构建

PDX模型：NSG小鼠尾静脉注射模拟白血病浸润（骨髓、脾脏受累显著）。

药物筛选：评估JAK2抑制剂（如鲁索替尼）对伴随性突变的效果。

3. 培养与质控标准：

标准化操作

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 10 ng/mL IL-3（或IL-5） + 1%双抗。

传代要点：

无需消化，直接离心（300g, 5分钟）后重悬，传代比例1:3至1:5。

维持密度在2-5×10? cells/mL（避免过度聚集）。

冻存：冻存液含10% DMSO + 90% FBS，程序降温后液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测FIP1L1-PDGFRA融合基因（FISH或RT-PCR）及STR分型。

功能检测：

伊马替尼IC??测定（敏感型通常＜0.1 μM）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。